Fatemeh Hosseinzadeh

1 Departamentul de Nutriție Clinică, Școala de Nutriție și Științe Alimentare, Universitatea Shiraz de Științe Medicale, Shiraz, Iran;

vindecător

2 Centrul de Cercetare în Nutriție și Științe Alimentare, Universitatea de Științe Medicale Shiraz, Shiraz, Iran;

Moosa Salehi

1 Departamentul de Nutriție Clinică, Școala de Nutriție și Științe Alimentare, Universitatea Shiraz de Științe Medicale, Shiraz, Iran;

2 Centrul de Cercetare în Nutriție și Științe Alimentare, Universitatea de Științe Medicale Shiraz, Shiraz, Iran;

Nader Tanideh

3 Stem Cell Technology Research Center, Universitatea de Științe Medicale Shiraz, Shiraz, Iran;

4 Departamentul de farmacologie, Școala de Medicină, Universitatea de Științe Medicale Shiraz, Shiraz, Iran;

Davood Mehrabani

3 Stem Cell Technology Research Center, Universitatea de Științe Medicale Shiraz, Shiraz, Iran;

Azadeh Sayarifard

5 Centrul pentru Politici Academice și de Sănătate, Universitatea de Științe Medicale din Teheran, Teheran, Iran;

Anahita Sedighi

6 Departamentul de biologie celulară și moleculară, filiala științelor farmaceutice, Universitatea Islamică Azad, Teheran, Iran

Abstract

FUNDAL

Bolile inflamatorii intestinale conțin două boli ale sistemului digestiv, colita ulcerativă (UC) și boala Crohn cu cauze neclare. Scopul prezentului studiu a fost de a investiga efectele terapeutice ale administrării uleiului de susan (SO) și uleiului de semințe de struguri (OSG) ca cale de clismă la șobolanii care suferă de UC acetic experimental indus.

METODE

Optzeci de șobolani masculi au fost alocați aleatoriu în 8 grupe egale ca control al sănătății (HC1) fără nicio boală tratată cu 1 ml ser fiziologic normal ca clismă; HC2 a primit SO; HC3 a primit OSG; control negativ (NC) cu UC indusă care primește 1 ml de soluție salină normală ca clismă; și control pozitiv (PC) cu UC indusă tratată cu asacol. Toate tratamentele au fost efectuate în mod identic cu 4 mg/kg de medicament, cu excepția asacolului care a fost de 100 mg/kg timp de 7 zile. Schimbările de greutate au fost înregistrate după șapte zile. Au fost măsurate nivelurile serice de malondialdehidă (MDA), capacitate antioxidantă totală (TAC), interleukină-6 și proteină c-reactivă (CRP). Modificările histologice macroscopice și microscopice ale colonului au fost, de asemenea, măsurate la sfârșitul celei de-a 7-a zile.

REZULTATE

Nu au fost detectate modificări semnificative ale greutății nici în grupuri în ziua 0, nici la sfârșitul studiului. Nu s-au observat efecte benefice pentru toate tratamentele privind procesul de vindecare și scăderea inflamației. Între grupurile de tratament, au aparținut cele mai scăzute MDA (7,40 ± 0,98 U/ml), CRP (83,20 ± 10,01 mg/l) și IL-6 (130,86 ± 10,70 mU/ml) și cele mai mari TAC (1,91 ± 0,43 mmol/l) grupului OSG.

CONCLUZIE

Clisma GSO singură poate fi considerată un tratament de alegere pentru UC datorită proprietăților sale antioxidante.

INTRODUCERE

Bolile inflamatorii intestinale (IBD) conțin două boli ale sistemului digestiv, colita ulcerativă (UC) și boala Crohn (CD) cu cauze neclare. Apariția UC poate fi afectată de mediu, genetică, factori imuni și microbiota intestinală. 1 UC este demonstrat de inflamația mucoasei și limitat la colon. A fost raportată o biodiversitate semnificativ redusă în numărul microbian fecal și diversitatea la pacienții cu IBD, comparativ cu cei din controalele sănătoase. 1, 2 S-a raportat că aportul mare de grăsimi mono și polinesaturate și vitamina B6 este asociat cu un risc crescut de a dezvolta UC. 3

Deci, se poate sugera că utilizarea oricărui agent chimic sau pe bază de plante pe ruta clismei poate fi eficientă în tratamentul UC prin schimbarea microbiomului colonului și, de asemenea, prin producerea de efecte locale. Există mai multe modalități de a induce UC la animalele experimentale, cum ar fi utilizarea acidului acetic, deoarece acidul acetic este ieftin și este disponibil în majoritatea laboratoarelor. 4 Strugurele este o boabă fructificatoare a vițelor lemnoase de foioase din genul botanic Vitis. 5 Uleiul din semințe de struguri (OSG) are multe utilizări, de la gătit (ca aditiv alimentar), produse cosmetice și controlul mai multor boli și potențialul de vindecare a rănilor. 6 Semințele de struguri și OSG sunt bogate în acizi grași nesaturați și antioxidanți precum tocoferoli, fitosterol și α- și γ-tocotrienol. 7

Deși conținutul de ulei și compoziția de acizi grași din semințele de struguri prezintă variații mari între diferite genotipuri8, dar s-a raportat că acizii grași predominanți în OSG erau linoleici (65,0%), linolenici (1,5%), oleici 17,0%) și acizi palmitici (8,0%) care paly roluri semnificative în metabolismul lipidelor. 9 Spre deosebire de OSG, uleiul de susan (SO) este un ulei cunoscut care a prezentat orice efecte terapeutice datorită agenților săi antioxidanți, antibacterieni și antiinflamatori. 10, 11 Nu există rapoarte despre utilizarea GSO cu sau fără SO în acidul acetic indus de UC, nici în aplicarea căilor clismelor, nici pe alte căi. Prin urmare, scopul acestui studiu a fost de a evalua efectul vindecător al OSG singur sau în combinație cu SO pe cale clismatică în colita ulcerativă indusă de acid acetic.

MATERIALE ȘI METODE

Utilizarea animalelor experimentale în acest studiu a fost aprobată de Comitetul Etic al Universității de Științe Medicale din Shiraz. S-au făcut toate eforturile pentru a reduce la minimum stresul și manipularea animalelor, precum și bunăstarea animalelor a fost luată în considerare în toată partea studiului. Optzeci de șobolani Sprague Dawley masculi (200 ± 20 g) au fost obținuți de la Centrul de Medicină Experimentală și Comparată, Universitatea Shiraz de Științe Medicale, Shiraz, Iran. Șobolanii au fost alocați aleatoriu în 8 grupuri separate, după cum urmează, și au fost adăpostiți în cuști standard în cadrul unui ciclu de lumină de 12 ore (luminile aprinse la 19:00) cu o temperatură ambiantă de 22 ± 2 ° C și o umiditate relativă de 55%.

Grupul de control sănătos I (HC1) nu a fost supus inducției UC și a primit 1 ml de soluție salină normală pe cale clismă, grupul HC2 nu a suferit inducție UC și a primit 4 mg/kg de SO, grupul HC3 nu a suferit inducție UC și a primit 4 mg/kg OSG, grupul de control negativ (NC) a fost supus inducției UC și a primit 1 ml de soluție salină normală pe cale clismă, grupul de control pozitiv (PC) a suferit inducție UC și a primit 100 mg/kg de asacol pe cale clismei, grupul SO a suferit UC inducție și a primit 4 mg/kg de SO pe cale de clismă, grupul GSO a suferit inducție UC și a primit 4 mg/kg de OSG pe cale de clismă și grupul SO + GSO care a suferit inducție UC și a primit atât 4 mg/kg SO și 4 mg/kg OMG pe cale clismă.

Uleiurile utilizate în acest studiu au fost uleiul de semințe de struguri Zareentalia (Zareentalia Co, Italia) și uleiul de susan Samar (Samar Co, Iran). Aceste uleiuri au fost produse din materii prime de cea mai bună calitate și având certificate de producție standard. Toate animalele au fost postite peste noapte și intestinele lor au fost curățate înainte de inducerea UC la golirea colonului. Inducția UC a fost efectuată folosind 2 ml de acid acetic 3% transrectal, așa cum s-a descris anterior. 4 Toate tratamentele au fost aplicate pe cale de clismă.

Schimbările de greutate au fost înregistrate înainte de studiu (ziua 0) și în ziua a 7-a (sfârșitul studiului), utilizând o cântare digitală cu precizie de 0,1 g. La sfârșitul celor șapte zile, șobolanii au fost sacrificați în cutia de inducție a CO2. Apoi, cei 8 cm distali ai colonului au fost îndepărtați și disecați prin incizie longitudinală. Am procesat, colorat și evaluat țesuturile colonului șobolanilor din fiecare grup, după cum sa raportat anterior. 12 indici care sunt prezentați de Morris și colab. 13 la 0-5 grade pentru leziunile macroscopice ale mucoasei, de Murthy și colab. 14 la 0-4 grade pentru leziunile criptelor și Onderdonk și colab. 15 ca 0-3 grade pentru nivelul inflamației au fost utilizate în acest studiu pentru a evalua modificările histopatologice ale țesuturilor colonului.

Probele de ser au fost separate de sângele inimii folosind centrifugarea (3000 rpm, 10 min). Nivelul de malondialdehidă (MDA), ca produs final al peroxidării lipidelor (LPO) și unul dintre cei mai importanți indici de stres oxidativ, a fost evaluat prin măsurarea substanțelor reactive ale acidului tiobarbituric (TBARS) în seruri. 16 În plus, capacitatea antioxidantă totală (TAC) din ser a fost evaluată prin metoda colorimetrică folosind trusa comercială (Cayman, SUA). Conținutul IL-6 al serului a fost măsurat folosind un kit ELISA sandwich special pentru șobolan (Sigma Aldrich, SUA). CRP seric a fost evaluat prin setul de test imunoenzimatic enzimatic (IBL internațional, Germania).

Toate variabilele noastre evaluate au fost parametri biologici și au o distribuție normală în populație. Prin urmare, ne putem confrunta cu aceasta ca variabile parametrice. Datele sunt prezentate ca medie și deviație standard. Normalitatea datelor a fost verificată prin testul Kolmogorov-Smirnov. Testul ANOVA unidirecțional și Tukey post hoc au fost utilizate pentru compararea diferențelor medii la toate variabilele între 8 grupuri. a zecea zi (p> 0,05). Cu toate acestea, cea mai mare greutate medie a aparținut grupului OSG (187,63 ± 9,74 g). Media și SD ale scorurilor macroscopice și microscopice în diferite grupuri sunt prezentate în Tabelul 1. După cum se arată, NC și apoi SO + GSO au avut cel mai înalt grad de leziuni macroscopice, care s-au diferit semnificativ de grupul HC1 (p 0,05).

tabelul 1

Modificări Wight, evaluări macroscopice și microscopice ale țesutului colonului în diferite grupuri