Abstract

Am descris anterior descoperirea unui nou inhibitor al absorbției colesterolului, ezetimibul (Fig. 1) (1, 2, 3), care scade colesterolul LDL și crește colesterolul HDL la oamenii hipercolesterolemici (4). Se cresc dovezi că reducerea colesterolului plasmatic prin mijloace dietetice și/sau farmacologice duce la reducerea incidenței decesului prin evenimente vasculare (5, 6, 7, 8). Ezetimibul progresează rapid prin studii clinice, dar nu se știe încă ce efect va avea ezetimibul în populația obeză de insulină rezistentă la insulină și/sau diabet zaharat de tip 2, care prezintă deseori atât hipercolesterolemie, cât și hipertrigliceridemie. Gestionarea dislipidemiei combinate este de cea mai mare importanță la aceste populații, deoarece aceste afecțiuni sunt asociate cu o incidență mult mai mare a bolilor cardiovasculare (9). În prezent, există foarte puțini agenți farmacologici care scad semnificativ atât colesterolul plasmatic, cât și nivelul trigliceridelor.

puternic

Structura ezetimibului, SCH58235 [1- (4-fluorofenil) - (3R) - [3- (4-fluorofenil) - (3S) -hidroxipropil] - (4S) - (4-hidroxifenil) -2-azetidinonă)].

PROIECTAREA ȘI METODELE CERCETĂRII

Hamsterii sirieni aurii masculi (Charles River Laboratory; Wilmington, MA) au fost adăpostiți individual în condiții de 12:12 lumină: întuneric (0700-1900) și li sa permis accesul gratuit la chow (Purina Rodent Chow 5001; Ralston Purina, St. Louis, MO ) și apă în timpul aclimatizării înainte de începerea studiului. Hamsterii (n = 6-7 pe grup) au fost repartizați la unul dintre următoarele tratamente dietetice, astfel încât greutățile corporale inițiale între grupuri au fost aceleași și li sa permis accesul gratuit la 1) chow, 2) chow + 0,12% (wt: wt) colesterol singur, 3) chow + 0,12% colesterol + 15% trimiristină (wt: wt, C14: 0), 4) chow + 0,12% colesterol + 15% trioleină (C18: 1), 5) chow + 0,12% colesterol + 15% trilinoleină (C18: 2) sau aceleași diete (diete 1-5) cu 1 mg/kg ezetimib amestecat în dieta chow (0,002%; Research Diets, New Brunswick, NJ). Trigliceridele purificate au fost furnizate de Karlshamns SUA (Columbus, OH) și Huls (Piscataway, NJ). Hamsterii au fost cântăriți săptămânal, iar aportul de alimente a fost măsurat intermitent pe parcursul perioadelor de hrănire de 20 și 84 de zile pentru a se asigura că hamsterii au prosperat în diferite regimuri dietetice și au primit dozele adecvate de ezetimib.

După 20 și 84 de zile, hamsterii au fost uciși de CO2, exsanguinați prin puncție cardiacă, iar ficatul a fost excizat, cântărit și înghețat la –80 ° C până la o analiză ulterioară. Serul a fost separat prin centrifugare cu viteză redusă, iar alicote au fost testate pentru insulină (Linco Research, St. Charles, MO), leptină (Multispecies Kit; Linco) și glucoză (Sigma; St. Louis, MO). O altă porțiune de ser proaspăt a fost supusă ultracentrifugării secvențiale pentru separarea următoarelor clase de lipoproteine: d 90%, respectiv> 80%, și nu a diferit între grupuri. Ficatele au fost extrase prin metoda lui Folch și colab. (17), și conținutul de colesteril ester și colesterol liber au fost determinate prin analize de cromatografie lichidă de înaltă performanță, așa cum s-a descris anterior în detaliu (18). Datele despre ficat sunt exprimate ca miligrame de colesteril ester sau colesterol liber pe ficat întreg.

Datele au fost analizate pentru semnificația statistică utilizând analiza varianței și testul t nepereche al lui Student. S-au efectuat comparații statistice comparând 1) grupul de control hrănit cu chow cu grupurile de tratament dietetic și 2) grupurile de tratament dietetic fără ezetimib cu cei cu ezetimib.

Rezultatele și concluziile trase pentru toate valorile serice au fost similare în eroare la compararea datelor de 20 de zile cu cele de 84 de zile, indicând faptul că starea de echilibru din compartimentul seric a fost atinsă cu 20 de zile. Valorile colesterolului hepatic au fost mai mari la hamsterii tratați timp de 84 de zile comparativ cu 20 de zile, deoarece colesterolul hepatic este un indice cumulativ, dar concluziile extrase din datele hepatice au fost, de asemenea, identice între punctele de timp de 20 de zile și cele de 84 de zile. Prin urmare, raportăm doar datele de 84 de zile, deoarece această perioadă mai lungă de timp este mai reprezentativă a ceea ce se întâmplă în timpul tratamentului cronic cu ezetimib și deoarece indică, de asemenea, că efectele hipolipidemice ale ezetimibului sunt menținute în timp.

Toate studiile au fost efectuate într-o unitate acreditată de Asociația pentru evaluarea și acreditarea îngrijirii animalelor de laborator, în conformitate cu protocoalele aprobate de Comitetul de îngrijire și utilizare a animalelor Schering-Plough Research Institute. Procedurile au fost efectuate în conformitate cu principiile și orientările stabilite de Institutele Naționale de Sănătate pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de laborator.

REZULTATE

Raportul dintre HDL și LDL colesterol. Raportul HDL la LDL colesterol (HDL: LDL) la hamsterii hrăniți cu chow, chow + 0,12% (wt: wt) colesterol sau aceeași dietă care conține colesterol cu ​​15% (wt: wt) trimiristină (C14: 0), trioleină (C18: 1) sau trilinoleină (C18: 2). Datele pentru hamsterii hrăniți fără ezetimib sunt în bare neumplute. Datele pentru hamsterii hrăniți cu diete care conțin 1 mg/kg ezetimib sunt în bare negre. Valorile sunt medii ± SE (n = 6-7 pe grup). * În mod semnificativ diferit de controalele alimentate cu chow, de 2 ori peste comenzile alimentate cu chow). Hipertrigliceridemia indusă a fost aproape normalizată de ezetimib. Hipertrigliceridemia indusă de dietele bogate în grăsimi s-a reflectat aproape exclusiv în fracțiunea VLDL + IDL (Fig. 5B). Ezetimibe a redus trigliceridele VLDL + IDL la niveluri hrănite cu chow. Trigliceridele au fost scăzute în fracțiile LDL și HDL, iar ezetimibul nu a avut niciun efect asupra trigliceridelor în aceste fracții (datele nu sunt prezentate).

Acumularea de colesteril ester și colesterol liber în ficat. Conținutul de colesteril ester (A) și colesterol liber (B) în ficat de la hamsteri hrăniți cu chow, chow + 0,12% (wt: wt) colesterol sau aceeași dietă care conține colesterol cu ​​15% (wt: wt) trimiristină (C14: 0 )), trioleină (C18: 1) sau trilinoleină (C18: 2). Datele pentru hamsterii hrăniți fără ezetimib sunt în bare neumplute. Datele pentru hamsterii hrăniți cu diete care conțin 1 mg/kg ezetimib sunt în bare negre. Datele sunt exprimate ca miligrame totale per ficat. Valorile sunt medii ± SE (n = 6-7 pe grup). * În mod semnificativ diferit de comenzile hrănite cu chow, P Vizualizați acest tabel:

  • Vizualizați în linie
  • Vizualizați fereastra pop-up

Greutatea hepatică a hamsterilor în diferite condiții alimentare în absența și prezența ezetimibului (1 mg/kg)

DISCUŢIE

Ezetimibul este un puternic inhibitor al absorbției colesterolului care scade colesterolul LDL și crește colesterolul HDL la oamenii hipercolesterolemici (4) și se află acum în studiile clinice de fază III. Studiile preclinice au demonstrat că ezetimibul inhibă selectiv transportul colesterolului radiomarcat prin peretele intestinal și în cele din urmă în plasmă (1,3). Mecanismul molecular precis prin care colesterolul este absorbit în intestin (și modul în care ezetimibul inhibă această absorbție) este în prezent necunoscut și este investigat intens.

Numeroase studii au arătat că hrănirea cu grăsimi dietetice în absența colesterolului nu modifică lipidele plasmatice sau serice (19,20,16). În studiile prezente, nivelul modest de colesterol din dietă (0,12%) singur a fost insuficient pentru a crește nivelul colesterolului seric sau al trigliceridelor. Includerea unui nivel ridicat de grăsimi alimentare (15%) în combinație cu aceeași cantitate de colesterol alimentar a dus la hipercolesterolemie și hipertrigliceridemie, în special cu grăsimi saturate, așa cum s-a descris anterior (12, 13, 14, 15, 16). Acest lucru ar sugera inițial că componenta de grăsime din dietă a fost cea mai importantă forță motrice din spatele hiperlipidemiei combinate. Cu toate acestea, inhibarea absorbției colesterolului din intestin cu ezetimibul a ameliorat complet hiperlipidemia combinată indusă de combinația de colesterol și grăsimi, indicând faptul că grăsimile dietetice fără absorbția colesterolului însoțitor nu au afectat lipidele serice. Datele indică astfel că este necesară combinația de colesterol dietetic moderat și grăsimi ridicate pentru a exista hiperlipidemie combinată, care este de fapt situația dietetică naturală într-o mare parte a populației umane.

Din punct de vedere clinic, acest lucru are implicații potențiale pentru oamenii care prezintă hiperlipidemie combinată, care include populația în creștere a pacienților obezi și diabetici de tip 2. Este bine acceptat faptul că incidența ridicată a hiperlipidemiei, obezității și diabetului de tip 2 în emisfera occidentală este cauzată de o predispoziție genetică compusă de o dietă bogată în colesterol și grăsimi. Pacienții sunt sfătuiți să reducă atât colesterolul alimentar, cât și aportul de grăsimi pentru a reduce hiperlipidemia. La un număr mare de pacienți, aceste modificări alimentare au un efect redus sau doar modest de scădere a lipidelor, parțial din cauza complianței pacientului și parțial datorită creșterii concomitente a sintezei colesterolului care însoțește o scădere a consumului de colesterol din dietă. În prezent, acestor pacienți li s-a prescris apoi un inhibitor de hidroximetil glutaril CoA reductază („o statină”) pentru a reduce sinteza colesterolului, iar scăderea cu succes a colesterolului plasmatic se realizează adesea.

Datele din prezentul raport sugerează că hipercolesterolemia și hipertrigliceridemia induse de colesterolul modest și dietele bogate în grăsimi pot fi în mare măsură ameliorate prin blocarea absorbției colesterolului, care ar include atât colesterolul alimentar, cât și cel biliar. La oamenii hipercolesterolemici, ezetimibul singur a scăzut semnificativ colesterolul LDL (-18,5%) și a crescut colesterolul HDL (+ 3,5%) (4). Combinația de ezetimib și statine a demonstrat o sinergie semnificativă în scăderea colesterolului în studiile preclinice (10,11). Studii recente la oameni hipercolesterolemici au demonstrat că combinarea simvastatinei (10-20 mg/zi) și ezetimibului (10 mg/zi) a dus la o scădere cu 50-60% a colesterolului LDL în 2 săptămâni de tratament (21,22). Efectul ezetimibului în monoterapie și în combinație cu statinele nu a fost încă testat la om cu hiperlipidemie combinată. Pe baza studiilor prezente, ezetimibul în monoterapie poate duce la o reducere a colesterolului plasmatic și a trigliceridelor la oameni cu hiperlipidemie combinată, cum ar fi pacienții obezi cu rezistență la insulină și/sau diabet de tip 2. Combinarea celor două intervenții farmacologice poate duce la o scădere mai mare decât este posibilă în prezent la pacienții cu hiperlipidemie combinată.

Note de subsol

Adresați corespondență și solicitări de retipărire către Margaret van Heek, K15-2-2600, Schering-Plough Research Institute, 2015 Galloping Hill Rd., Kenilworth, NJ 07033. E-mail: margaret.vanheekspcorp.com .

Primit pentru publicare la 17 august 2000 și acceptat sub formă revizuită la 14 februarie 2001.