Afiliere Clinica Medica, Departamentul de Științe Clinice și Experimentale, Universitatea din Brescia, Brescia, Italia

limfocitelor

Afiliere Clinica Medica, Departamentul de Științe Clinice și Experimentale, Universitatea din Brescia, Brescia, Italia

Catedra de afiliere reumatologie, Departamentul de Științe Clinice și Experimentale, Universitatea din Brescia, Brescia, Italia

Roluri Curarea datelor

Catedra de afiliere reumatologie, Departamentul de Științe Clinice și Experimentale, Universitatea din Brescia, Brescia, Italia

Catedra de afiliere reumatologie, Departamentul de Științe Clinice și Experimentale, Universitatea din Brescia, Brescia, Italia

Afiliere Clinica Medica, Departamentul de Științe Clinice și Experimentale, Universitatea din Brescia, Brescia, Italia

Afiliere Clinica Medica, Departamentul de Științe Clinice și Experimentale, Universitatea din Brescia, Brescia, Italia

Afiliere Clinica Chirurgica, Departamentul de Științe Clinice și Experimentale, Universitatea din Brescia, Brescia, Italia

Roluri Curarea datelor

Afiliere Clinica Chirurgica, Departamentul de Științe Clinice și Experimentale, Universitatea din Brescia, Brescia, Italia

Afiliere Clinica Chirurgica, Departamentul de Științe Clinice și Experimentale, Universitatea din Brescia, Brescia, Italia

Afiliere Clinica Medica, Departamentul de Științe Clinice și Experimentale, Universitatea din Brescia, Brescia, Italia

Afiliere Clinica Medica, Departamentul de Științe Clinice și Experimentale, Universitatea din Brescia, Brescia, Italia

Roluri Analiza formală

Afiliere Clinica Medica, Departamentul de Științe Clinice și Experimentale, Universitatea din Brescia, Brescia, Italia

Roluri Curarea datelor

Afiliere Clinica Chirurgica, Departamentul de Științe Clinice și Experimentale, Universitatea din Brescia, Brescia, Italia

Afiliere Clinica Medica, Departamentul de Științe Clinice și Experimentale, Universitatea din Brescia, Brescia, Italia

Roluri Curarea datelor

Afiliere Clinica Chirurgica, Departamentul de Științe Clinice și Experimentale, Universitatea din Brescia, Brescia, Italia

Catedra de afiliere reumatologie, Departamentul de Științe Clinice și Experimentale, Universitatea din Brescia, Brescia, Italia

Roluri Curarea datelor

Afiliere Clinica Chirurgica, Departamentul de Științe Clinice și Experimentale, Universitatea din Brescia, Brescia, Italia

Afiliere Clinica Medica, Departamentul de Științe Clinice și Experimentale, Universitatea din Brescia, Brescia, Italia

Roluri Conceptualizare, Scriere - proiect original

Afiliații Clinica Medica, Departamentul de Științe Clinice și Experimentale, Universitatea din Brescia, Brescia, Italia, Istituto Clinico Città di Brescia, Divizia de Medicină, Brescia, Italia

  • Claudia Agabiti-Rosei,
  • Valentina Trapletti,
  • Silvia Piantoni,
  • Paolo Airò,
  • Angela Tincani,
  • Carolina De Ciuceis,
  • Claudia Rossini,
  • Francesco Mittempergher,
  • Amin Titi,
  • Nazario Portolani

Cifre

Abstract

Obiectiv

S-a demonstrat anterior că limfocitele T pot fi implicate în dezvoltarea hipertensiunii și a remodelării microvasculare și că limfocitele efectoare T circulante pot fi crescute în hipertensiune. În special, limfocitele Th1 și Th 17 pot contribui la progresia hipertensiunii și a leziunilor microvasculare, în timp ce limfocitele cu reglare T (Treg) par a fi protectoare în acest sens. Cu toate acestea, nu sunt disponibile date despre pacienții cu obezitate severă, în care au fost observate modificări microvasculare pronunțate.

Proiectare și metode

Am investigat 32 de pacienți cu obezitate severă supuși unei intervenții chirurgicale bariatrice, precum și 24 de subiecți slabi normotensivi și 12 subiecți slabi hipertensivi supuși unei intervenții chirurgicale elective. O probă de sânge periferic a fost obținută înainte de operație pentru evaluarea subpopulațiilor de limfocite T CD4 +. Fenotipul limfocitar a fost evaluat prin citometrie în flux pentru a evalua limfocitele T-efector și Treg.

Rezultate

O reducere marcată a mai multor subpopulații Treg a fost observată la pacienții obezi comparativ cu martorii, împreună cu o creștere a celulelor efectoare T cu memorie efectoare CD4 +.

Concluzie

La pacienții cu obezitate severă, limfocitele Treg sunt reduse în mod clar și celulele de memorie efectoare CD4 + sunt crescute. Se poate presupune că acestea pot contribui la dezvoltarea unor modificări microvasculare marcate observate anterior la acești pacienți.

Citare: Agabiti-Rosei C, Trapletti V, Piantoni S, Airò P, Tincani A, De Ciuceis C, și colab. (2018) Scăderea limfocitelor regulatoare T circulante la pacienții obezi supuși unei intervenții chirurgicale bariatrice. PLoS ONE 13 (5): e0197178. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0197178

Editor: Xianwu Cheng, Universitatea Nagoya, JAPONIA

Primit: 9 decembrie 2017; Admis: 27 aprilie 2018; Publicat: 14 mai 2018

Disponibilitatea datelor: Toate datele relevante se găsesc în lucrare.

Finanțarea: Autorii nu au primit fonduri specifice pentru această lucrare.

Interese concurente: Autorii au declarat că nu există interese concurente.

Introducere

Incidența și prevalența crescândă a obezității în aproape toate țările din întreaga lume are un impact dramatic asupra riscului cardiovascular [1,2]. Un stres oxidativ sistemic/inflamație crescut este un acompaniament obișnuit al obezității [3-6], după cum sugerează observarea, în mai multe studii, a markerilor circulanți crescuți, inclusiv interleukina-6, proteina C reactivă, factorul de necroză tumorală alfa și activatorul plasminogenului inhibitor-1 [3-6]. Pacienții obezi, independent de prezența hipertensiunii arteriale, prezintă modificări structurale microvasculare, împreună cu disfuncție endotelială [7]. După corecția chirurgicală a obezității și pierderea constantă în greutate, sa observat o îmbunătățire semnificativă a structurii microvasculare și a unor markeri de stres oxidativ/inflamație [7].

Pacienți și metode

Am investigat treizeci și doi de pacienți cu obezitate abdominală severă, definiți în conformitate cu ghidurile italiene actuale [24] și admiși la secția chirurgicală a spitalului nostru pentru indicații la intervenția chirurgicală bariatrică, în special la un bypass jejuno-ileal sau la o derivare biliopancreatică.

Protocolul studiului a fost aprobat de comitetul de etică al instituției noastre (Facultatea de Medicină, Universitatea din Brescia) și a fost obținut un consimțământ scris în scris de la fiecare participant. Procedurile urmate au fost în conformitate cu orientările instituționale.

Optsprezece pacienți obezi au fost normotensivi și 14 hipertensivi, conform ghidului Societății Europene de Hipertensiune și al Societății Europene de Cardiologie 2013 [25]. Controalele au fost reprezentate de 24 de subiecți normotensivi slabi și 12 pacienți slabi cu hipertensiune arterială esențială, supuși unei intervenții chirurgicale standard. Majoritatea celor 14 pacienți obezi hipertensivi și din cei 12 pacienți hipertensivi slabi au fost tratați anterior cu diferite medicamente antihipertensive, deși nu a existat nicio diferență între grupuri în proporția pacienților tratați, precum și în tipurile de medicamente antihipertensive. Nu a existat o potrivire pre-specificată a cazurilor și controalelor, iar întreaga populație investigată este reprezentativă pentru populația de pacienți internați de obicei la secția noastră chirurgicală. Prin urmare, cele 36 de controale slabe au fost înscrise consecutiv și apoi, post hoc, subdive în hipertensivi și normotensivi.

S-au prelevat probe de sânge venos pentru hematologie standard și teste de biochimie serică (inclusiv trigliceride și colesterol total) la pacienții obezi și la subiecții slabi și pacienți.

Evaluarea fenotipului limfocitului T CD4 + circulant

Caracterizarea fenotipică a celulelor T CD4 + din sânge periferic a fost efectuată prin citometrie în flux (Cytomics NAVIOS, Beckman Coulter Inc., Fullerton, CA), după cum sa raportat anterior [14,26]: 100 microlitri de sânge integral au fost incubați amestec de anticorpi monoclonali (din Beckman Coulter, R&D Systems, Caltag Laboratories, Becton Dickinson, San Jose, CA), conjugat cu fluorocromi la 4 ° C timp de 30 de minute. Celulele T CD3 + CD4-CD8- dublu-negative au fost evaluate la toți pacienții și nu s-a observat nicio diferență între persoanele normotensive și hipertensive. Numărul absolut de celule a fost determinat prin analiza cu o singură platformă folosind margele Flow-Count (Beckman Coulter).

CD4 + Tregs au fost definite prin expresia ridicată a CD25 și expresia/absența redusă a CD127, folosind anti-CD4 conjugat cu PC5, anti-CD25 conjugat PE și anti-CD127 conjugat cu PC-7 [27].

În plus, au fost identificate diferite subpopulații de Treg folosind, în două tuburi separate, CCR7 conjugat FITC sau CD31 conjugat FITC și CD45RA conjugat ECD.

Subseturile de Tregs au fost definite după cum urmează: -Emigranti timici recenți (RTE), derivați direct din timus: CD31 +; -Naiv: CCR7 + CD45RA +; -Memorie centrală (CM): CCR7 + CD45RA-; -Memoria efector (EM): CCR7-CD45RA-; -Memoria efectoare diferențiate terminale (TDEM): CCR7-CD45RA +. În cele din urmă, numărul EM a fost evaluat între toate celulele T CD4 + (CD4 + EM).

Exemple de date de citometrie în flux și strategia de gating folosite sunt raportate în Fig 1.