Molecular
Medicament
Rapoarte

• Ultimii doi ani
• Total

• Anul trecut 0
• Total

• Luna trecuta
• Anul trecut
• Total

• Dimitris Tsoukalas
• Persephone Fragkiadaki
• Anca Oana Docea
• Athanasios K. Alegakis
• Evangelia Sarandi
• Maria Thanasoula
• Demetrios A. Spandidos
• Aristidis Tsatsakis
• Mayya Petrovna Razgonova
• Daniela Calina

Acest articol este menționat în:

Abstract

Introducere

Scopul prezentului studiu a fost de a testa suplimentele și extractele naturale pentru capacitatea lor de a spori activitatea telomerazei în celulele mononucleare din sângele periferic uman (PBMC). Demonstrăm că formularea extractului Centella asiatica (08AGTLF) poate duce la activarea telomerazei semnificativ mai mare în comparație cu celulele netratate, precum și TA-65 și alte suplimente care conțin extract de Astragalus și CAG. Acesta este primul studiu, cel puțin din cunoștințele noastre, care demonstrează că o formulare naturală, cum ar fi formularea de extract de Centella asiatica (08AGTLF) poate duce la o astfel de activitate telomerazică ridicată în raport cu celulele de control.

Materiale și metode

Formulări

Formularea extractului Centella asiatica (08AGTLF) care consta din> 95% triterpene de înaltă puritate a fost obținută de la ApexBio Company. Acidul oleanolic (OA) a fost obținut de la Sigma-Aldrich și acidul de măsline (MA) a fost obținut de la Extrasynthese. Nutrient 1 și Nutrient 2 (conținutul prezentat mai jos) au fost obținute de la Lumis Research S.A. Nutrientul 3 și Nutrientul 4 (conținutul prezentat mai jos) au fost obținute de la Natural Doctor S.A. Fiecare compus a fost dizolvat în etanol pentru a obține diferite concentrații care trebuie testate în culturile celulare.

Izolarea celulară și măsurători ale activității telomerazei

Protocolul acestui studiu a fost aprobat de Comitetul de etică pentru pacienți și material biologic al Universității din Creta cu referința nr. 63/22.03.2019. Toate procedurile efectuate implicând participanți umani au fost efectuate în conformitate cu standardele etice ale declarației de la Helsinki din 1964 și cu modificările ulterioare ale acesteia, sau standarde etice comparabile. Studiul a fost realizat folosind probe preparate de la donatori sănătoși care s-au oferit voluntar să participe la studiu. Eșantioanele au fost anonimizate, iar datele cu caracter personal au fost gestionate în conformitate cu Regulamentul general al UE privind protecția datelor (GDPR).

PBMC au fost izolate din probele de sânge prin centrifugare cu gradient Ficoll-Hypaque. Celulele au fost crescute în DMEM (Biochrom AG; F0455) suplimentat cu 10% ser fetal bovin (FBS; 10500-064, inactivat termic; Invitrogen; Thermo Fisher Scientific), glutamina (4 mM; Biosera XCT1715), gentamicină (15710– 049; Invitrogen; Thermo Fisher Scientific) și penicilină/streptomicină (100 U/ml; Biosera LMA4118). Înainte de adăugarea agenților de testare, celulele au fost cultivate în mediu fără ser timp de 24 de ore la 37 ° C și 5% CO2. PBMC-urile au fost apoi tratate cu compuși la diferite concentrații, timp de 24-72 ore. Probele de PBMC au fost colectate la 24-72 ore după tratament, spălate în tampon PBS și depozitate la -80 ° C. Activitatea telomerazei a fost măsurată utilizând o telomerază comercială PCR-ELISA (Sigma-Aldrich), pe baza protocolului de amplificare repetată telomerică, așa cum s-a descris anterior (27-30). Toate tratamentele pentru fiecare afecțiune au fost efectuate în trei exemplare.

Conținutul nutrienților 1, 2, 3 și 4

Nutrientul 1 (My Shape) conține următoarele: acid alfa lipoic, scorțișoară) extract uscat de coajă 1/4 (Cinnamomum zeylanycum N.), citrat de magneziu, L-glutamină, tartrat de L-carnitină, citrat de potasiu, acid ascorbic, ascorbat de magneziu, ceai verde (Camellia sinensis K.) frunze de extract uscat titrat la 95% polifenoli, vitamina E acetat natural 50%, enzimă (amilază, protează, glucoză amilază, lipază, celulază, lactază, pectinază), niacină, bitamină B1, vitamina K2 Mena Q7 0,2%, seleniu metionină, vitamina B2, β-caroten, vitamina B5, bitartrat de colină, inozitol, acid para-aminobenzoic (PABA), vitamina B6, vitamina B12 1%, picolinat de crom, vitamina D3 2,5%, biotină, acid folic, agent anti-aglomerare (celuloză, mono- și digliceride ale acidului gras, stearat de magneziu, dioxid de silice).

Nutrient 2 (My Health) conține următoarele: Mix Vitamină (acid ascorbic, acetat de vitamina E 50% natural, niacină, vitamina B1, vitamina K2 Mena Q7 0,2%, vitamina B6, β-caroten, vitamina B12 1%), anti- agenți de aglomerare (celuloză microcristalină, mono- și digliceride ale acizilor grași, stearat de magneziu, dioxid de silice).

Nutrientul 3 (cofactori Vit. D3 și K2, 1 capsulă) conținea următoarele: 2.000 OH 25 D 3, 100 µg vitamină K2 (MK7), 56 mg magneziu elementar sub formă de bisglicinat de magneziu.

Nutrientul 4 (REYOUTH, 1 capsulă) conține următoarele: Vitamina C (50 mg), Magneziu (58 mg), CAG (16 mg) și amestec de aminoacizi conținând L-glutamină, L-lizină, L-prolină, L- glicină, L-arginină, L-leucină, L-histidină, L-izoleucină, L-valină, L-metionină, L-tirozină, acid glutamic, L-fenilalanină, L-serină, L-treonină, L-alanină, L -citrulină, L-taurină, L-triptofan, acid aspartic, vitamina E (12 mg), calciu, vitamina B3, extract uscat de broccoli, extract uscat de fructe și legume, amestec de enzime digestive (Enzymix), potasiu, vitamina B1, zinc, Vitamina B6, mangan, fosfor, B-caroten, Vitamina B5, inozitol, Vitamina K2, Vitamina B2, PABA, Vitamina D3, biotină, crom, cupru, seleniu, molibden, Vitamina B12.

TA-65 (1 capsulă) conținea următoarele: Astragalus membranaceus extract moench (TA-65 ® MD, 8 mg).

analize statistice

figura 1.

Tabelul I.

Concentrații în µg/ml ale tuturor formulărilor și compușilor utilizați pentru măsurarea activității telomerazei în PBMC.

Tabelul I.

Concentrații în µg/ml ale tuturor formulărilor și compușilor utilizați pentru măsurarea activității telomerazei în PBMC.

[i] PBMC, celule mononucleare din sângele periferic; 08AGTLF, Centella asiatica formulare extract; MA, acid de măsline; OA, acid oleanolic.

Nivelurile de activitate ale telomerazei au crescut cu toate cele 3 concentrații utilizate pentru Nutrient 4 în comparație cu celulele netratate (creștere de până la 4,3 ori) cu cea mai mare activare la concentrația de 12,8 µg/ml (absorbanță 0,38; IC 95%, 0,311-0,456) și a urmat un model ușor descrescător la concentrații de 25 și 51 µg/ml (95% CI, 0,321-0,426 și 0,320-0,414, respectiv). În plus, diferența de activitate a telomerazei în raport cu celulele netratate au fost toate semnificative statistic, cu P 0,05).

Figura 2.

Figura 3.

Formulările care au inclus extract de Astragalus cu diferite compoziții (de exemplu, Nutrient 4 și TA-65) au prezentat, de asemenea, un efect semnificativ statistic asupra activității telomerazei, dar mult mai mic în comparație cu 08AGTLF, ajungând la o creștere de 4,3 ori pentru Nutrient 4 și de 2 ori creștere pentru TA- 65 relativ la celulele netratate. În acord cu rezultatele noastre, Molgora și colab. Au demonstrat că TA-65 care conține CAG, un algicon al Astragalosidei IV, a crescut activitatea telomerazei în mod semnificativ de 1,3 până la 3,3 ori față de martorii din culturile de celule T umane. În mod similar, s-a demonstrat că CAG activează telomeraza atât in vitro, cât și in vivo (22). În special, s-a demonstrat că CAG activează telomeraza și prelungește telomerele într-o manieră dependentă de telomerază in vitro și scade procentul de telomeri critic scurți și daune ADN din celulă (35).

În special, Nutrient 4, un amestec de substanțe nutritive care conține extract CAG de Astragalus a prezentat un efect mai mare asupra activității telomerazei comparativ cu TA-65 (creștere de 4,3 ori), sugerând efectul sinergic al extractului de Astragalus cu ceilalți nutrienți conținuți în Nutrient 4. Într-un studiu recent realizat de Bruno et al, autorii au examinat efectele unui supliment multivitaminic asupra lungimii telomerilor și au sugerat că activarea telomerazei mediată de acest supliment a dus la o lungime mai mare a telomerilor (36).

Există numeroase studii care au asociat suplimentarea nutraceutică cu activitatea telomerazei, lungimea telomerilor și stresul oxidativ și trebuie remarcat faptul că produsele naturale care conțin mai mult de un antioxidant sunt mai eficiente decât administrarea unuia singur, sugerând un efect sinergic între acești compuși ( 43,44). În acest studiu, am testat Nutrient 1 și Nutrient 2, care constau dintr-un amestec de vitamine și antioxidanți și am constatat că aceste suplimente declanșează o ușoară creștere a activității telomerazei. De acord cu acest lucru, Balcerczyk și colab. Au examinat efectul unui supliment alimentar asupra parametrilor legați de homeostazia redox și de îmbătrânire și au constatat că activitatea telomerazei în PBMC de la femeile sănătoase a crescut cu> 25% (45). În mod surprinzător, Nutrient 3, care conține vitamina D, a dus la o creștere semnificativ mai mare a activității telomerazei (de aproximativ 2 ori mai mare), în comparație cu celulele netratate. Această constatare este în concordanță cu faptul că suplimentarea cu vitamina D a crescut semnificativ activitatea telomerazei PBMC la afro-americani supraponderali, după cum arată Zhu și colab, sugerând că vitamina D poate îmbunătăți întreținerea telomerilor, precum și preveni senescența celulară și accelerarea indusă de obezitate a îmbătrânire celulară (46).

În concluzie, conform modelului nostru in vitro, s-a observat o creștere a activității telomerazei între 2 și 9 ori în comparație cu celulele netratate cu moleculele noastre testate. Important, formularea 08AGTL care conține extract de Centella asiatica a fost cel mai puternic activator printre alte suplimente disponibile în comerț, provocând o creștere de aproape 9 ori a activității telomerazei la 0,02 µg/ml. Mai mult, puterea 08AGTL în creșterea activității telomerazei a fost evidentă atunci când s-a tradus în activarea telomerazei în raport cu controlul pozitiv, deoarece a atins 17,3% din activitatea telomerazei de control pozitiv, procent semnificativ mai mare decât restul compușilor testați (Fig. 3) . Scopul acestui studiu a fost identificarea compușilor naturali care cresc semnificativ activarea telomerazei și pot duce la o speranță de viață mai lungă și la o îmbătrânire sănătoasă. 08AGTLF, care conține extract de Centella asiatica, pare a fi un compus atât de natural cu un efect puternic asupra activității telomerazei, care rămâne de validat cu viitoare cercetări bazate pe studii controlate randomizate independente care investighează mecanismele de bază. Foarte important, viitoarele studii de intervenție asupra oamenilor sunt justificate pentru a examina efectul acesteia asupra lungimii telomerilor, a îmbătrânirii și a sănătății umane.

Mulțumiri

Studiul face parte din partea specială a doctoratului. teza de la Universitatea de Medicină și Farmacie și Craiova. Autorii doresc să mulțumească întregului personal administrativ, tehnic și medical al Toxplus S.A., al Clinicii de Sănătate în Medicină Metabolomică S.A. și al Laboratorului de Toxicologie pentru implicarea lor dedicată în acest studiu.

Finanțarea

Acest studiu a fost finanțat de Metabolomic Medicine S.A. și Toxplus S.A. și susținut de Contul special de cercetare al Universității din Creta (ELKE nr. 4602, 4920 și 3963).

Disponibilitatea datelor și a materialelor

Seturile de date prezentate în acest studiu sunt disponibile de la autorul corespunzător, la cerere rezonabilă.

Contribuțiile autorilor

DT, PF, AT, DAS și DC au conceput și proiectat studiul și au scris manuscrisul. MT, PF, MPR și ES au efectuat procesarea datelor și evaluarea controlului calității. AKA, AOD și MT au efectuat analiza statistică și interpretarea datelor. Toți autorii au examinat și aprobat manuscrisul înainte de depunere.

Aprobarea eticii și consimțământul de participare

Protocolul acestui studiu a fost aprobat de Comitetul de etică pentru pacienți și material biologic al Universității din Creta cu numărul de referință 63/22.03.2019. Materialul biologic și informațiile pacienților au fost obținute cu consimțământul informat în scris, în conformitate cu Regulamentul general al UE privind protecția datelor (GDPR). Toate procedurile efectuate în studii care au implicat participanți umani au fost în conformitate cu standardele etice cu declarația de la Helsinki din 1964 și modificările ulterioare ale acesteia, sau standarde etice comparabile.

• Chile Relleno Caserola Rețetă Dairy Discovery Zone
• Alimente Separarea completă a uleiului în reducerea textului gratuit în alimentele terapeutice gata de utilizat HTML
• Curățarea descoperirii cancerului cu Edge
• Olandeză Rețetă de prăjitură cu unt Zonă de descoperire a produselor lactate
• Tot ce trebuie să știți despre zona de descoperire a produselor lactate din brânză de vaci