1 Laborator de cercetare în farmacologie, Departamentul de Farmaceutică, Institutul de Tehnologie, Universitatea Banaras Hindu, Varanasi 221 005, India

hypericum

2 laboratoare de cercetare în farmacologie, Dr. Willmar Schwabe GmbH & Co. KG, Karlsruhe, Germania

3 Stettiner Straße 1, 76138 Karlsruhe, Germania

Abstract

Hypericum perforatum se știe că are diverse utilizări medicinale de secole. Activitatea antidepresivă a Hypericum perforatum este larg acceptat și dovedit atât în ​​studiile clinice, cât și pe animale. Studiul actual a fost întreprins pentru a investiga efectul Hypericum perforatum într-o baterie de modele animale pentru tulburarea metabolică. Hypericum este testat pentru activitate hipolipidemică la șobolani normali, activitate antiobezitate la șobolani obezi induși cu diete bogate în grăsimi și șobolani hrăniți cu fructoză. Hypericum a fost administrat oral ca suspensie în 0,3% carboximetil celuloză la doze de 100 și 200 mg/kg greutate corporală timp de 15 zile consecutive. Hypericum a scăzut semnificativ colesterolul total și colesterolul cu densitate scăzută la șobolanii normali. Hypericum a inhibat semnificativ creșterea în greutate la șobolanii cu conținut ridicat de grăsimi. La șobolanii hrăniți cu fructoză, Hypericum a normalizat dislipidemia indusă de alimentarea cu fructoză și a îmbunătățit sensibilitatea la insulină. Luat impreuna, Hypericum ar putea fi terapia antidepresivă la alegere pentru pacienții care suferă de diabet comorbid și obezitate.

1. Introducere

2. Materiale și metode

2.1. Animale

Șobolani adulți Charles Foster (150 ± 10 g) au fost obținuți de la Casa Centrală a Animalelor a Institutului de Științe Medicale, Universitatea Banaras Hindu, Varanasi, India. Animalele au fost adăpostite în grupuri de șase în cuști din polipropilenă la o temperatură ambiantă de 25 ± 1 ° C și 45-55% umiditate relativă, cu un ciclu de lumină/întuneric de 12:12 h. Animalele au primit peleți alimentari din comerț și apă ad libitum, cu excepția cazului în care se prevede altfel. Toate animalele au fost aclimatizate la condițiile de laborator timp de cel puțin o săptămână înainte de a le folosi pentru experimente. Au fost respectate principiile liniilor directoare de îngrijire a animalelor de laborator (publicația NIH numărul 85-23, revizuită în 1985). A fost obținută aprobarea prealabilă din partea Comitetului instituțional pentru etica animalelor (Scrisoarea nr. Decan/2009-10/693).

2.2. Extract de plante

Extract hidroalcoolic uscat (50%) din planta întreagă de Hypericum perforatum L. a fost utilizat în prezentul studiu. Extract standardizat a fost obținut de la Indian Herbs Research and Supply Co. Ltd., Saharanpur, India. Extractul de Hypericum perforatum (HpE) a fost standardizat prin HPLC pentru a conține nu mai puțin de 3,00% hyperforin și 0,3% hypericinsi, astfel, extractul utilizat în prezentul studiu a fost similar cu extractele de Hypericum studiat anterior în laboratorul nostru [2, 4-6].

2.3. Administrarea extractului de plante

HpE a fost suspendat în 0,3% carboximetil celuloză (CMC) și administrat oral printr-un tub orogastric la doze de 100 și 200 mg/kg greutate corporală pe zi timp de 15 zile consecutive. Dozele sunt selectate pe baza studiilor anterioare din laboratorul nostru pe același extract [2, 4-6, 11].

2.4. Activitate hipolipidemică la șobolani normali
2.5. Hipertrigliceridemie indusă de fructoză și rezistență la insulină

Șobolanii au fost menținuți pe o dietă normală cu pelete (NPD) și 20% fructoză în apă potabilă timp de 15 zile [16-18]. Șobolanilor de control li s-a administrat NPD și apă potabilă normală pe toată durata studiului. Șobolanii au fost împărțiți în mod aleatoriu în diferite grupuri după cum urmează: Grupul I: NPD + apă potabilă normală + 0,3% CMC (16-16 zile), Grupul II: NPD + 20% apă fructoză + 0,3% CMC (16-16 zile), Grupa-III: NPD + apă potabilă normală + 0,3% HpE 100 mg/kg (a 16-a până la a 30-a zi), Grupa-IV: NPD + apă potabilă normală + HpE 200 mg/kg (a 16-a-a 30-a zi), Grupa-V: NPD + 20% apă fructoză + HpE 100 mg/kg (a 16-a până la a 30-a zi), Grupa VI: NPD + 20% apă fructoză + HpE 200 mg/kg (a 16-a până la 30 zi).

Administrarea extractului de plante a început din a 16-a zi și a fost continuată până în a 30-a zi a experimentului. Șobolanilor din grupul I (control normal) și grupului II (control cu ​​fructoză) li s-a administrat un volum egal de vehicul (0,3% suspensie CMC) pentru aceeași durată. Greutatea corporală a șobolanilor a fost înregistrată în prima zi și ulterior o dată pe săptămână, la fel și aportul de alimente și apă a fost înregistrat săptămânal [18]. Probele de sânge au fost extrase din plexul venos retroorbital în a 30-a zi după postul adecvat, iar TC plasmatic, HDL-C, LDL-C, TG și glucoză au fost estimate folosind kituri biochimice. Glucoza a fost estimată prin metoda glucozei oxidazei/peroxidazei, ca în studiile noastre anterioare [11, 12]. Pe scurt, glucoza a fost transformată în acid gluconic și H2O2 în prezența glucozei oxidazei. Ulterior, într-o reacție catalizată de peroxidază, oxigenul eliberat a fost acceptat de sistemul cromogen pentru a da un compus chinin-imină de culoare roșie. Absorbanța culorii roșii a fost măsurată la 505 nm și a fost direct proporțională cu concentrația de glucoză. Nivelul de insulină plasmatică a fost estimat utilizând testul imunosorbent legat de enzime (trusa ELISA; DRG Diagnostics, GmbH, Germania).

2.6. Obezitate indusă de dietă bogată în grăsimi

Șobolanii au fost menținuți pe un NPD timp de o săptămână înainte de începerea experimentului. După o săptămână, șobolanii au fost repartizați aleatoriu în grupuri normale și obezi și hrăniți cu NPD și, respectiv, HFD timp de 15 zile. Dieta bogată în grăsimi a fost făcută așa cum este descris de Srinivasan și colab. [23]. După 15 zile, șobolanii hrăniți cu HFD care au prezentat o creștere semnificativă în greutate în comparație cu șobolanii NPD au fost din nou împărțiți în trei grupuri (șase șobolani în fiecare grup): grupul martor HFD hrănit doar cu HFD, HFD + HpE (100 mg/kg ) și grupul HFD + HpE (200 mg/kg). Tratamentul cu HpE a fost început din ziua a 16-a până în ziua 30. Șobolanilor din grupul de control li s-a administrat NPD pentru toate cele 30 de zile de studiu. Grupului de control și grupului de control HFD li s-a administrat un volum egal de 0,3% suspensie CMC din ziua a 16-a până la a 30-a zi.

Greutatea corporală a fost înregistrată în prima zi și apoi săptămânal. Aportul mediu de alimente a fost înregistrat în zilele 1, 15 și 30. Probele de sânge de post au fost colectate în a 30-a zi din plexul venos retro-orbital sub anestezie cu eter ușor. Au fost estimate nivelurile de glucoză plasmatică, insulină, TC, LDL-C, HDL-C și TG. În a 30-a zi, după recoltarea probei de sânge, animalele au fost sacrificate și tampoanele de grăsime mezenterice, perirenale și epididimale au fost izolate și cântărite [24].

2.7. Analize statistice

Datele au fost exprimate ca medie ± eroare standard a mediei (SEM) pentru fiecare grup

. Analiza statistică a fost efectuată prin analiza unică a varianței (ANOVA) urmată de testul Student-Newman-Keuls. Pentru analiza statistică a fost utilizat software-ul GraphPad InStat (versiunea 3.06).

3. Rezultate

3.1. Activitatea hipolipidemică la șobolani

15 zile de administrare orală cu HpE au dus la o scădere semnificativă a colesterolului total plasmatic (

𝐹 (3, 2 0) = 1 9. 6 9; 𝑃. 0 0 1

) și nivelul LDL-C comparativ cu grupul de control tratat de vehicul. Tratamentul cu clofibrat a scăzut colesterolul total, LDL-C (

𝐹 (3, 2 0) = 1 8. 5 6

) și trigliceride cu creștere simultană a HDL-C comparativ cu grupul de control (

3 (3, 2 0) = 1 0. 3 7

). Rezultatele sunt rezumate în Tabelul 1. Nu a existat nicio diferență semnificativă statistic în greutatea corporală a diferitelor grupuri de tratament pe parcursul studiului (datele nu sunt prezentate).