Abstract

Introducere

Pentru a clarifica mecanismul anti-aterosclerotic al antagonistului receptorului AT1 la primate, am investigat dacă un antagonist al receptorului AT1, olmesartanul, afectează funcția endotelială și markerii serici ai inflamației și factorii de creștere la maimuțele care au primit o dietă bogată în colesterol.

Metode

Protocol experimental

Maimuțe (Macaca fascicularis, n = 18) din ambele sexe au fost achiziționate de la Keari Co (Osaka, Japonia). Greutatea corporală a acestor maimuțe a variat între 4,3 și 6,2 kg. Toate maimuțele erau adăpostite la temperatura camerei (23-26 ° C) cu un ciclu de lumină - întuneric de 12 ore și aveau acces gratuit la alimente și apă. Șase maimuțe au fost hrănite cu o dietă normală timp de 6 luni (grup cu dietă normală). Doisprezece maimuțe, cărora li s-a administrat o dietă bogată în colesterol timp de 6 luni, au fost împărțite în mod egal într-un grup de control cu ​​dietă bogată în colesterol și într-un grup cărora i s-a administrat olmesartan medoxomil (10 mg/kg/zi, pe cale orală). Dieta bogată în colesterol, care conținea 4% colesterol și 6% ulei de porumb, și dieta normală au fost achiziționate de la Oriental Yeast Co (Osaka).

La momentul inițial și la 1 lună, 3 luni și 6 luni, TA sistolică (SBP) și ritmul cardiac au fost monitorizate direct folosind un cateter (Suflo) (Termo, Tokyo, Japonia) cu un traductor la maimuțe sub anestezie cu clorhidrat de ketamină (10 ). mg/kg intramuscular). Probele de sânge au fost prelevate pentru a măsura nivelurile de lipide la momentul inițial și la 2 luni, 4 luni și 6 luni. La sfârșitul perioadei de tratament de 6 luni, maimuțele au fost anesteziate cu clorhidrat de ketamină (10 mg/kg intramuscular) și ucise prin exsanguinare. Aortele toracice descendente au fost îndepărtate rapid pentru analize histologice și biochimice.

Nivelurile de lipide din plasmă

Nivelurile colesterolului total, colesterolului cu lipoproteine ​​cu densitate scăzută (LDL) și colesterolului cu lipoproteine ​​cu densitate mare (HDL) au fost măsurate la momentul inițial și la 2 luni, 4 luni și 6 luni folosind un analizor automat de lipide (7250, Hitachi, Tokyo, Japonia ).

Analiza histologică

Au fost măsurate zonele leziunilor aterosclerotice ale aortei toracice. 5 Aorta toracică a fost fixată cu formalină tamponată. Țesutul fix a fost colorat cu ulei roșu O pentru vizualizarea prezenței depunerilor de lipide pe suprafața intimă. Aria aterosclerotică a fost calculată ca raportul dintre suprafața colorată cu ulei-roșu-O și suprafața totală cu un analizor de imagine (VM-30, Olympus, Tokyo). Imunomarcarea cu anticorp împotriva macrofagelor a fost utilizată pentru colorarea țesutului, folosind anticorpul HAM-56 (DAKO Corporation, Carpinteria, CA, SUA). 10

Răspunsul vascular

Arterele carotide au fost îndepărtate pentru experimentele de relaxare vasculară. Arterele au fost tăiate în benzi elicoidale, de 15 mm lungime și 2,0 mm lățime. Banda arterială a fost plasată pe un miograf sub o tensiune de repaus de 2,0 g. Mediul de scăldat a fost soluția Tyrode (137 mmol/l clorură de sodiu, 2,7 mmol/l clorură de potasiu, 1,8 mmol/l clorură de calciu, 1,1 mmol/l clorură de magneziu, 0,42 mmol/l dihidrogen fosfat de sodiu, 12 mmol/l bicarbonat de sodiu și 5,7 mmol/l glucoză, pH 7,4). Mediul a fost menținut la 37 ° C și a fost barbotat continuu cu 5% CO2 în oxigen. După perioada de echilibrare, artera a fost contractată cu noradrenalină (1 μmol/l) și apoi relaxată cu acetilcolină în funcție de doză (10 nmol/l până la 1 μmol/l). 11

Markeri serici

Kituri ELISA au fost utilizate pentru a determina nivelurile serice ale factorului de creștere transformant (TGF) -β1, factorului de stimulare a coloniilor de macrofage (M-CSF) și moleculei de aderență intracelulară (ICAM) -1 (R&D Systems, Minneapolis, MI, SUA).

analize statistice

Toate rezultatele sunt reprezentate ca medii ± eroare standard a mediei. Diferențele au fost considerate semnificative la P

Rezultate

Conditii generale

Toate maimuțele par să fie sănătoase și nu au existat diferențe în ceea ce privește greutatea corporală, SBP sau ritmul cardiac între animalele din grupul cu dietă normală și cele din grupul cu dietă bogată în colesterol tratate cu olmesartan sau netratate, după o lună, 3 luni și 6 luni.

Nivelurile de lipide din plasmă

După 2 luni, 4 luni și 6 luni, nivelurile colesterolului total și LDL din grupul cu dietă bogată în colesterol au fost semnificativ mai mari decât cele din grupul cu dietă normală (P figura 1

journal

Analiza histologică

Figura 2 prezintă segmente ale aortei colorate cu ulei roșu O din cele trei grupuri de maimuțe. Zonele de leziuni aterosclerotice în aortele toracice nu au fost observate în grupul cu dieta normală. În grupul cu dietă bogată în colesterol, raportul dintre suprafața aterosclerotică și suprafața totală a fost calculat a fi de 72 ± 6%, în timp ce în grupul alimentat cu dietă bogată în colesterol plus tratament cu olmesartan, acest raport a fost redus semnificativ la 25 ± 14% (P Figura 2

Segmente de aortă colorate cu ulei roșu O de la maimuțe hrănite (A) dieta normala, (b) dietă bogată în colesterol și (c) dieta bogata in colesterol plus tratament cu olmesartan (10 mg/kg/zi).

Figura 3 prezintă fotografii tipice ale secțiunilor transversale aortice din grupurile cărora li s-a administrat dieta normală, dieta bogată în colesterol și dieta bogată în colesterol, plus tratamentul cu olmesartan. Zona intimă și raportul dintre zona intimă și zona mediană în grupul cu dietă bogată în colesterol au fost semnificativ reduse prin tratamentul cu olmesartan (P Figura 3

Secțiuni transversale tipice ale aortei toracice de la maimuțele hrănite (A) dieta normala, (b) dietă bogată în colesterol și (c) dieta bogata in colesterol plus tratament cu olmesartan (10 mg/kg/zi).

Răspunsul vascular

Acetilcolina (10-1000 nmol/l) a provocat o relaxare dependentă de endoteliu într-un mod de concentrație-răspuns în toate grupurile. Relaxarea dependentă de endoteliu în grupul cu dietă bogată în colesterol a fost semnificativ redusă comparativ cu cea din grupul cu dietă normală (P

Discuţie

Proliferarea zonei intime a leziunilor aterosclerotice a fost în principal dependentă de acumularea de macrofage. Aceste constatări au fost observate și în leziunile aterosclerotice umane. 19.20 Keidar a raportat că A II induce modificarea LDL în LDL oxidat, care este preluat în macrofage pentru a încuraja formarea celulelor de spumă. 21 Angiotensina II induce, de asemenea, acumularea de macrofage prin inducerea proteinei chimiotratante monocite-1, despre care se știe că induce activarea și migrația monocitelor. 22 Mai mult, în acest studiu, olmesartanul a avut tendința de a reduce nivelurile serice de M-CSF și ICAM-1, ambele inducând, de asemenea, infiltrarea monocitelor în stratul intim și activarea macrofagelor, iar aceste acțiuni pot reduce, de asemenea, acumularea de macrofage. în stratul intim. Prin urmare, reducerea acumulării de macrofage în stratul intim de către olmesartan poate fi mecanismul predominant pentru suprimarea zonei intime.

Disfuncția endotelială a fost observată la leziunile aterosclerotice la pacienți și la modelele aterosclerotice. 23,24 În stratul intim al leziunilor aterosclerotice, macrofagele activate induc formarea de superoxizi prin activarea 12- sau 15-lipoxigenazelor. 23 Se observă că celulele musculare netede activate de A II induc, de asemenea, oxidaze dependente de NAD (P) H, care favorizează formarea superoxidului. 7 Creșterea formării superoxidului în stratul intim induce disfuncții endoteliale prin reducerea sintezei de oxid nitric din celulele endoteliale. 24 În acest studiu, dieta cu conținut ridicat de colesterol a redus semnificativ relaxarea indusă de acetilcolină, un vasodilatator dependent de endoteliu, sugerând că țesuturile vasculare ale leziunilor aterosclerotice prezintă o disfuncție endotelială, care este primul pas în dezvoltarea plăcii aterosclerotice. Relaxarea indusă de acetilcolină la acele maimuțe hrănite cu o dietă bogată în colesterol a fost, totuși, îmbunătățită semnificativ de olmesartan. Prin urmare, modul de acțiune anti-aterosclerotic al olmesartanului poate fi implicat în îmbunătățirea disfuncției endoteliale.

În concluzie, efectul anti-aterosclerotic observat cu olmesartan este cauzat de suprimarea factorilor de creștere, chemokine și molecule de aderență, inhibarea macrofagelor în straturile intime și ameliorarea disfuncției endoteliale.

Referințe

Dzau VJ. Patobiologia aterosclerozei și complicațiile plăcii Am Heart J. 1994 128: 1300–1304

Spence JD, Pesout AB, Melmon KL. Efectele medicamentelor antihipertensive asupra vitezei sângelui la maimuțele rhesus Accident vascular cerebral 1977 8: 589–594

Cântecul K și colab. Inducerea enzimei de conversie a angiotensinei și a receptorilor angiotensinei II în aorta aterosclerotică a maimuțelor Cynomolgus alimentate cu colesterol ridicat Ateroscleroza 1998 138: 171–182

Miyazaki M, Takai S. Efectul antiaterosclerotic al alcepril, un inhibitor al enzimei de conversie a angiotensinei, la maimuțele hrănite cu o dietă bogată în colesterol Hypertens Res 1999 22: 49–54

Miyazaki M, Sakonjo H, Takai S. Efectele anti-aterosclerotice ale unui inhibitor al enzimei de conversie a angiotensinei și ale unui antagonist al angiotensinei II la maimuțele Cynomolgus hrănite cu o dietă bogată în colesterol Br J Pharmacol 1999 128: 523–529

Hernandez-Presa M și colab. Inhibarea enzimei de conversie a angiotensinei previne activarea factorului nuclear arterial-kappa B, expresia proteinei-1 chemoattractante monocite și infiltrarea macrofagelor într-un model de iepure de ateroscleroză accelerată timpurie Circulaţie 1997 95: 1532–1541

Warnholtz A și colab. Creșterea producției de superoxid mediată de NADH-oxidază în stadiile incipiente ale aterosclerozei: dovezi ale implicării sistemului renină-angiotensină Circulaţie 1999 99: 2027–2033

Kim JA, Berliner JA, Nadler JL. Angiotensina II crește legarea monocitelor de celulele endoteliale Biochem Biophys Res Commun 1996 226: 862–868

Nakano N și colab. Reglarea negativă a expresiei factorului local de creștere a hepatocitelor de către angiotensina II și transformarea factorului de creștere beta în vasele de sânge: rolul potențial al HGF în bolile cardiovasculare Hipertensiune 1998 32: 444-451

Nishimoto M și colab. Formarea angiotensinei II chimimodependente în vena safenă versus artera toracică internă J Thorac Cardiovasc Surg 2001 121: 729-734

Sanz M, Ganado P, Ruiz E, Tejerina T. Efectul trandolaprilului asupra reacției vasculare în arterele izolate de iepure alimentate cu colesterol Eur J Pharmacol 2000 397: 359-365

Strawn WB și colab. Inhibarea aterogenezei timpurii de către losartan la maimuțele cu hipercolesterolemie indusă de dietă Circulaţie 2000 101: 1586–1593

Poston RN și colab. Exprimarea moleculei de adeziune intercelulară-1 în plăcile aterosclerotice Sunt J Pathol 1992 140: 665-673

Rajavashisth TB și colab. Inducerea expresiei celulelor endoteliale a factorilor de stimulare a coloniilor de granulocite și macrofage prin lipoproteine ​​modificate cu densitate mică Natură 1990 344: 254–257

Ishibashi S și colab. Factorul de stimulare a coloniei de monocite îmbunătățește absorbția și degradarea lipoproteinelor acetilate cu densitate mică și esterificarea colesterolului în macrofagele derivate din monocite umane J Biol Chem 1990 265: 14109–14117

Weir MR, Dzau VJ. Sistemul renină-angiotensină-aldosteron: o țintă specifică pentru gestionarea hipertensiunii Sunt J Hypertens 1999 12: 205С - 213С

Laviades C, Varo N, Diez J. Transformarea factorului de creștere beta la hipertensivi cu afectare cardiorenală Hipertensiune 2000 36: 517–522

Kiarash A. și colab. Expresia reglată în sus a moleculei de adeziune intercelulară a inimii de șobolan în angiotensina II, dar nu și hipertensiunea indusă de fenilefrină Hipertensiune 2001 37: 58–65

Okamura A și colab. Reglarea ascendentă a sistemului renină-angiotensină în timpul diferențierii monocitelor la macrofage J Hypertens 1999 17: 537–545

Fukuhara M și colab. Expresia enzimei de conversie a angiotensinei în ateroscleroza arterei carotide umane Hipertensiune 2000 35: 353–359

Keidar S. Angiotensina, peroxidarea LDL și ateroscleroza Life Science 1998 63: 1-11

Chen XL și colab. Angiotensina II induce expresia genei proteinei-1 chemoattractante monocite în celulele musculare netede vasculare de șobolan Circ Res 1998 83: 952-959

Scheidegger KJ, Butler S, Witztum JL. Angiotensina II crește modificarea mediată de macrofage a lipoproteinei cu densitate mică printr-o cale dependentă de lipoxigenază J Biol Chem 1997 272: 21609–21615

Prasad A și colab. Antagonismul receptorilor angiotensinei-1 acută și cronică inversează disfuncția endotelială în ateroscleroză Circulaţie 2000 101: 2349–2354

Mulțumiri

Acest studiu a fost susținut parțial de Grant-in-Aid pentru încurajarea tinerilor oameni de știință 12770048, de Grant-in-Aid for Research Research (B) 11470027 de la Ministerul Educației, Științei, Sportului și Culturii, Japonia.

Informatia autorului

Afilieri

Departamentul de farmacologie, Colegiul de medicină din Osaka, Osaka, Japonia

M Miyazaki & S Takai

Puteți căuta acest autor și în PubMed Google Scholar

Puteți căuta acest autor și în PubMed Google Scholar

autorul corespunzator

Drepturi și permisiuni

Despre acest articol

Citați acest articol

Miyazaki, M., Takai, S. Eficacitatea anti-aterosclerotică a olmesartanului. J Hum Hypertens 16, S7 - S12 (2002). https://doi.org/10.1038/sj.jhh.1001393

Publicat: 24 aprilie 2002

Data emiterii: 01 mai 2002

Cuvinte cheie

  • angiotensina II
  • ateroscleroza
  • blocant al receptorilor
  • maimuţă
  • olmesartan

Lecturi suplimentare

Managementul hipertensiunii arteriale cu blocanți ai receptorilor angiotensinei: dovezi actuale și rolul olmesartanului

Terapie cardiovasculară (2018)

RETRAGERE: Mecanisme moleculare ale irbesartanului care suprimă ateroscleroza la șoarecii knock-out cu apolipoproteină E cu colesterol ridicat

  • Rui Yao
  • , Xiang Cheng
  • , Yong Chen
  • , Jiang-Jiao Xie
  • , Xian Yu
  • , Meng-Yang Liao
  • , Ying-Jun Ding
  • , Ting-Ting Tang
  • & Yu-Hua Liao

Revista Internațională de Cardiologie (2010)

Există efecte ale antagoniștilor sistemului renină - angiotensină dincolo de controlul tensiunii arteriale?

Jurnalul American de Cardiologie (2010)

Remodelare cardiacă și aortică favorabilă la șobolanii hipertensivi spontan tratați cu olmesartan

  • Caroline Fernandes-Santos
  • , Leonardo de Souza Mendonça
  • & Carlos Alberto Mandarim-de-Lacerda

Inima și vasele (2009)

Eficacitatea și siguranța olmesartan medoxomil singur și în asociere cu hidroclorotiazidă

Revizuirea expertă a terapiei cardiovasculare (2009)