Abstract

Introducere

Pancreatita acută (AP) este o boală inflamatorie frecventă a pancreasului cu multiple cauze, printre care hipertrigliceridemia este a treia cea mai frecventă și reprezintă până la aproximativ 10% din toate cazurile (1). Studiile clinice au raportat că pacienții cu SAP cu HTG și obezitate suferă un curs clinic mai sever și complicații, inclusiv răspuns inflamator sistemic agravant, insuficiență multiplă a organelor, infecție și mortalitate ridicată (2-4). Experimentele pe animale au furnizat, de asemenea, dovezi că HTG cu SAP ar putea exacerba edemul și necroza pancreasului (5). Cu toate acestea, mecanismul exact rămâne neclar.

hipertrigliceridemia

SIRS este o manifestare timpurie a sindromului disfuncției organelor multiple (MODS) și a insuficienței multiple a organelor (MOF) (6). SAP are două puncte de vârf în care riscul de mortalitate este ridicat: primul este MODS timpuriu, care este de obicei cauzat de deteriorarea continuă a SIRS, iar al doilea apare ca urmare a sepsisului (7). Prin urmare, în stadiul incipient al pancreatitei, orice factor care agravează SIRS va crește rata mortalității pacienților. Pe baza cunoștințelor de mai sus, am emis ipoteza că HTG și obezitatea pot juca un rol important în durata și severitatea SIRS în stadiu incipient. Prin urmare, acest studiu a fost efectuat pentru a explora mecanismul care stă la baza modului în care HTG și obezitatea intensifică evoluția SIRS indusă de SAP la șobolani.

Materiale și metode

Animale experimentale și protocoale

Toate protocoalele experimentale pe animale au fost aprobate de Comitetul de îngrijire și utilizare a animalelor din cadrul Universității de Știință și Tehnologie din China de Nord, iar experimentele au fost efectuate în conformitate cu liniile directoare ale comitetului (numărul de aprobare: 20130051).

Design de studiu. SO, acționat în mod fals; SAP, pancreatită acută severă; SO2, 6, 24 h, lipid normal + acționat de fals + sacrificat la 2, 6 sau 24 h; SAP2, 6, 24 h, lipide normale + SAP + sacrificate la 2, 6 sau 24 h; HSO2, 6, 24 h, HTG + acționat fals + sacrificat la 2, 6 sau 24 h; HSAP2, 6, 24 h, HTG + SAP + sacrificat la 2, 6 sau 24 h.

Biochimie serică

Nivelurile serice de amilază, lipază, calciu (Ca2 +), trigliceride (TG) și colesterol total (TC) au fost analizate folosind un analizor biochimic automat (7600, Hitachi, Japonia).

Analiza nivelurilor de TNF-a, IL-6 și IL-10 în ser

Pe scurt, probele de sânge au fost colectate și coagulate la temperatura camerei, iar probele de ser au fost obținute după centrifugare. Nivelurile serice de TNF-α, IL-6 și IL-10 au fost evaluate folosind kituri ELISA (Cat # 88-7324-22, BMS603-2, 88-7105-22 Thermofisher, SUA). Intensitatea culorii a fost măsurată cu ajutorul unui cititor de microplăci (Thermal, SUA).

Evaluarea patologiilor pancreatice

Pancreasul fiecărui șobolan a fost fixat cu 10% formaldehidă, încorporat în parafină, tăiat în secțiuni de 4 μm și colorat cu hematoxilină și eozină. Sistemul de notare aplicat pentru evaluarea examenelor histologice a urmat o descriere anterioară (9, 10), așa cum se arată în Tabelul 1. Evaluarea a fost efectuată de doi investigatori care au fost orbi la tratamentul experimental. Au fost observate cinci câmpuri din fiecare eșantion, iar scorurile totale ale celor cinci câmpuri au fost mediate.

Scor histologic pentru SAP

analize statistice

Efectele unei diete bogate în grăsimi asupra șobolanilor. A. Graficul cu bare al greutății corporale în grupurile normale de lipide și HTG. B. Graficul cu bare al nivelurilor serice de TG și TC în grupurile normale de lipide și HTG. C. Grăsime viscerală în grupul HTG.

HTG și obezitatea exacerbează cursul SIRS

Scorurile SIRS din fiecare grup au fost calculate pe baza criteriilor de mai sus. Așa cum se arată în Figura 3C, scorurile SIRS au fost în mod semnificativ mai mari în grupul SAP decât în ​​grupul SO. În comparație cu cei din grupul SAP, scorurile SIRS au crescut în grupul HSAP, în special la momentul de 24 de ore. De asemenea, am constatat că nivelurile plasmatice ale citokinelor proinflamatorii IL-6 și TNF-a au fost semnificativ mai mari în grupul HSAP decât în ​​grupul SAP și că reglarea descendentă a citokinei pro-inflamatorii IL-10 a fost semnificativ redusă în grupul HSAP în comparație cu cea din grupul SAP, și toate au fost semnificativ diferite la momentul de 24 de ore (Fig. 5B, C, E).

HTG și obezitatea agravează hipocalcemia. A. Saponificare pe mezenterul intestinului subțire B. Grafic cu bare de calciu seric.

Efectele HTG și ale obezității asupra amilazei serice, lipazei, TNF-α, IL-6 și IL-10. A, B, C, D, E: Grafice cu bare ale amilazei serice, lipazei, TNF-α, IL-6 și IL -10, respectiv.

Discuţie

În comparație cu principalii factori etiologici, cum ar fi calculii biliari și abuzul de alcool, HTG este al treilea factor cel mai important în SIRS, fiind găsit în până la 7% din cazuri (11). În plus, pancreatita HTG tinde să fie mai severă decât alte cauze (12). Cercetările clinice anterioare au arătat că SIRS persistent la pacienții cu HTG a fost mai mare decât cel la pacienții normali (13). Mai mult, obezitatea contribuie probabil la creșterea incidenței și severității pancreatitei acute (14) și ar putea servi drept indicator de prognostic (15). Cu toate acestea, mecanismul exact rămâne neclar.

Hipocalcemia este una dintre componentele sistemului de notare Ranson care este utilizat pentru a evalua severitatea pancreatitei. Studiile anterioare pe modele animale au arătat că hipocalcemia este un marker al prognosticului slab la pacienții cu pancreatită (22). Mecanismele propuse pentru hipocalcemie sunt autodigestia grăsimii mezenterice de către enzimele pancreatice și eliberarea acizilor grași liberi, care suferă saponificare. În studiul nostru, nivelurile de calciu din sânge au scăzut semnificativ în grupurile HSAP la 24 de ore, iar observarea macroscopică a țesutului adipos a arătat că saponificarea pe mezenterul intestinului subțire din grupul HSAP a fost mai mare decât cea din SAP grup.

Concluzie

Rezultatele noastre au arătat că șobolanii HSAP au avut leziuni pancreatice mai severe și scoruri SIRS mai grave decât au avut șobolanii SAP. Mecanismul de bază poate fi intensificarea SIRS în stadiu incipient legat de HTG și obezitate ca urmare a dezechilibrului citokinelor inflamatorii și antiinflamatorii.

Conflicte de interes

Autorii declară că nu au conflicte de interese

Aprobare etică

Toate procedurile efectuate în cadrul studiilor au fost în conformitate cu standardele etice ale instituției la care au fost efectuate studiile.

Mulțumiri

Autorii doresc să-i mulțumească Dr. Rui Li pentru sugestiile sale valoroase.