Parvin Babaei

1 Centrul de cercetare celulară și moleculară, Universitatea de Științe Medicale Guilan, Rasht, Iran.

efectul

2 Centrul de cercetare în neuroștiințe, Universitatea de Științe Medicale Guilan, Rasht, Iran.

Adele Dastras

1 Centrul de cercetare celulară și moleculară, Universitatea de Științe Medicale Guilan, Rasht, Iran.

Bahram Soltani Tehrani

1 Centrul de cercetare celulară și moleculară, Universitatea Guilan de Științe Medicale, Rasht, Iran.

Shiva Pourali Roudbaneh

3 Departamentul de moașă, Școala de asistență medicală, moașă și paramedicină, Universitatea Guilan de științe medicale, Rasht, Iran.

Abstract

Obiective

S-a demonstrat că hormonii ovarieni reglează greutatea corporală, acumularea de grăsime intraabdominală și nivelurile plasmatice de citokine. Scopul acestui studiu a fost de a investiga efectul terapiei de substituție a estrogenului asupra țesutului adipos visceral, nivelul plasmatic al apelinului, profilurilor lipidice și glucozei la șobolanii ovariectomizați (OVX).

Metode

Treizeci de șobolani femele Wistar au fost împărțiți în grupuri OVX (n = 20) și fals (n = 10). Șobolanii OVX au fost împărțiți în terapie de substituție estrogenică (OVX + est; n = 10) primind 17 valerați de β-estradiol (30 µg/kg, sc, 5 zile/săptămână, timp de opt săptămâni) și grupul de control al vehiculelor care a primit ulei de susan la fel ca grup de experiment (OVX + ulei de ses; n = 10). După tratamente, toate grupurile au fost sacrificate și s-au recoltat probe de sânge, au fost prelevate grăsimi viscerale din cavitatea abdominală și cântărite imediat. Apelinul a fost măsurat folosind kituri de testare imunosorbente legate de enzime. Profilurile lipidice și glucoza au fost măsurate folosind metoda colorimetrică enzimatică. Datele au fost analizate cu o analiză unidirecțională a varianței și (P Cuvinte cheie: Apelin, Terapie de substituție estrogenică, Glucoză, Grăsime intra-abdominală, Șobolani

Introducere

Obezitatea este acum recunoscută ca o problemă majoră de sănătate publică, care constituie un factor de risc pentru bolile care pun viața în pericol, cum ar fi diabetul de tip 2 și bolile cardiovasculare (BCV), precum și unele tipuri de cancer.1 Aceste tulburări reprezintă cauze majore de morbiditate și mortalitate. în țările industrializate și cresc probleme și în țările în curs de dezvoltare

Obezitatea, ca fiind cele mai frecvente tulburări la femeile climatice, apare la aproximativ 65% dintre ele3 din cauza modificărilor metabolismului țesutului adipos visceral.4,5 Menopauza este asociată cu o creștere a nivelului hormonului foliculostimulant și a nivelului hormonului luteinizant și cu o scădere a estrogenilor. .6, 7,8,9 Femeile au mai multe grăsimi corporale în comparație cu bărbații și există o diferență specifică sexului în distribuția grăsimilor. La femei, țesutul adipos se acumulează în special în jurul șoldurilor, feselor și coapselor, în timp ce bărbații au o masă de grăsime intraabdominală mai mare.10,11 Pedersen și colab. în celulele grase subcutanate umane prin creșterea cantității de receptori α2-adrenergici anti-lipolitici. Acest lucru poate explica modul în care estradiolul este legat de distribuția tipică a țesutului adipos subcutanat feminin, deoarece această inhibiție nu este observată în depozitele de grăsime viscerală. La femei, estradiolul poate schimba acumularea de grăsime din depozitele viscerale în depozitele subcutanate.12 Redistribuirea grăsimii corporale, după menopauză, este asociată cu CVD10,11 și sindromul metabolic.

Într-un studiu recent, ovariectomia (OVX) la șobolani a dus la o acumulare progresivă de grăsime în abdomen, riscuri crescute de rezistență la insulină, dislipidemie și BCV. 14,15 Adipokinele sunt o nouă legătură interesantă între obezitate, rezistența la insulină și BCV.15, 16 Apelin este o adipokină bioactivă recent identificată. Este un endogen al receptorului cuplat cu proteine ​​G din domeniul șapte transmembrană (TM) orfan, proteină de receptor putativă legată de receptorul de angiotensină AT1 (APJ), care este funcțional similar cu receptorul cuplat de angiotensină-1. 17,18

Existența apelinului și a receptorului său în diferite țesuturi ale omului și șoarecilor, cum ar fi: hipotalamus, hipofiză anterioară, vase endoteliale, inimă, plămâni, stomac, rinichi, glande mamare, tiroidă, ovarian, mucus de colon, pancreas, țesut adipos, ficat și mușchi dezvăluie rolul pe scară largă al acestui hormon.18,19,20,21,22,23,24,25,26,27,28,29 Hormonul reglează creșterea țesutului adipos și are un rol în procesul de inflamație cronică cauzată de creșterea țesutul adipos și stresul.24,28 Apelin reglează în sus steroizii sexuali, insulina, factorul de necroză tumorală-α și hormonul de creștere în țesuturile adipoase ale omului și șoarecilor.19,23,24,25,26,27,28,29 Această citokină este implicată în reglarea fluidelor și a consumului de alimente în hipotalamus22 și creșterea concentrației de apelină are ca rezultat consumul de energie.30,31,32

În ceea ce privește faptul că grăsimea viscerală este sursa adipokinelor, mai ales apelina, am emis ipoteza că deficiența de estrogen ar putea fi o posibilitate de reducere a nivelului de apelină și, în consecință, acumularea de grăsime viscerală cu alte grupuri de componente ale sindromului metabolic.

Conform cunoștințelor noastre, relația dintre concentrația plasmatică de apelină și tratamentul cu estrogeni nu a fost încă studiată. Prin urmare, scopul acestui studiu a fost de a determina efectul terapiei de substituție a estrogenului asupra grăsimii viscerale, nivelul apelinei serice. Pentru a aborda aceste obiective, am folosit șobolani OVX ca model de menopauză.33,34,35,36,37

Materiale și metode

Șobolani femele Wistar (n = 30), cu o greutate cuprinsă între 180 și 200 g (vârsta de 2 luni) au fost utilizate în acest studiu. Cu excepția grupului fals, toți animalele au suferit o intervenție chirurgicală OVX conform tehnicii descrise de Babaei și colab. 33 Pentru operație, șobolanii au fost anesteziați folosind un amestec de ketamină-xilazină (61,5-7,6 mg/kg, i.p.). Animalele au fost adăpostite câte patru pe cușcă și au fost hrănite cu șobolan standard cu pelete și au avut acces gratuit la apa de la robinet. Ciclul de lumină: întuneric de 12: 12 ore a început la ora 07:00 și temperatura camerei a fost menținută la 21 până la 23oC. Experimentele descrise în acest raport au fost efectuate în conformitate cu politica Comitetului de Etică al Universității Guilan de Științe Medicale.

1. Grupuri și protocol de tratament

Treizeci de șobolani femele Wistar au fost împărțiți în trei grupuri următoare: grupuri OVX (n = 20) și fals (n = 10). Șobolanii OVX au fost împărțiți în grupuri de terapie de substituție estrogenică (OVX + est; n = 10) și terapie cu ulei de susan (OVX + ulei de ses; n = 10). Șobolanii din grupul OVX + est au primit injecții subcutanate cu valerat de 17β-estradiol (30 mg/kg greutate corporală; Sigma-Aldrich Corp., St. Louis, MO, SUA) dizolvate în 0,2 ml ulei de susan (Aburaihan Pharma Co., Teheran), Iran), trei zile pe săptămână, timp de opt săptămâni. Șobolanii din grupul de uleiuri OVX + ses au primit același volum de ulei de susan. Toți șobolanii au fost cântăriți de două ori pe săptămână, între orele 09:00 și 11:00 pentru a obține o greutate săptămânală pentru fiecare animal, s-au calculat două greutăți. Pentru a măsura aportul de alimente, o cantitate egală de alimente (20 g/zi/șobolan) a fost dată tuturor șobolanilor și consumul lor a fost măsurat în ziua următoare prin scăderea restului de alimente nemâncate din totalul dat. Toate grupurile experimentale au avut inițial o masă corporală medie similară și au fost tratate în mod similar în ceea ce privește manipulările zilnice. Greutatea corporală, aportul de alimente și grăsimea viscerală au fost măsurate utilizând scara precisă la 0,1 g (Sartorius, Goettingen, Germania).

2. Procedura analitică

1) Indicele masei corporale (IMC)

Toți șobolanii au fost cântăriți de două ori pe săptămână, între orele 09:00 și 11:00. A fost obținută o medie a greutății pentru fiecare animal. Înălțimea animalului a fost măsurată sub anestezie generală de la tipul nasului la anus. IMC a fost măsurat împărțind greutatea la pătratul de înălțime (g/cm 2).

2) Proba de sânge

Mâncarea a fost scoasă din cușca animalului cu cel puțin 24 de ore înainte de scarificare. După anestezie completă, cavitatea abdominală a fost deschisă rapid și s-au extras probe de sânge din vena cavă inferioară. Serul a fost imediat separat prin centrifugare (3.000 rpm timp de 15 minute) și depozitat la -80 ℃ pentru măsurători biochimice și hormonale ulterioare.

Concentrația serică de apelină a fost măsurată prin setul de test imunosorbent legat de enzima apelinului de șobolan (Shanghai Crystal day Biotech Co., Shanghai, China). Concentrația serică de glucoză a fost determinată prin metoda colorimetrică enzimatică (glucoză oxidază-amino antipirină) (Pars Azmoun, Teheran, Iran) și colesterolul seric total (TC) și colesterolul lipoproteic de înaltă densitate (HDL-C) au fost determinate de enzimatic (Pars Azmoun ) metoda colorimetrică. Trigliceridele serice (TG) au fost determinate prin metoda colorimetrică enzimatică (Pars Azmoun). Glucoza serică, colesterolul, TG, HDLC și lipoproteinele cu densitate scăzută colesterolul I (LDL-C) au fost determinate ca și lucrările noastre anterioare.38,39 După colectarea probelor de sânge, toate depozitele de grăsime intra-abdominale, inclusiv mezenterice, urogenitale și retroperitoneale, au fost disecat de către un experimentator și cântărit imediat după disecție pentru a evita pierderea în greutate prin evaporare. Pătura de grăsime mezenterică consta din țesut adipos care înconjoară tractul gastro-intestinal de la sfincterul gastroesofagian până la capătul rectului. Tamponul de grăsime urogenitală a inclus țesut adipos care înconjoară rinichii, ureterele și vezica urinară, precum și ovarele, oviductele și uterul. Tamponul de grăsime retroperitoneal a fost luat distinct în spatele fiecărui rinichi de-a lungul mușchilor lombari.