Rita Rani

Divizia de Biochimie Animală, Institutul Național de Cercetare a Produselor Lăptare, Karnal, India

Vinod K. Kansal

Divizia de Biochimie Animală, Institutul Național de Cercetare a Produselor Lăptare, Karnal, India

Abstract

Context și obiective:

Studiul nostru anterior a arătat că ghee-ul de vacă în raport cu uleiul de soia a avut un efect protector împotriva cancerului mamar indus de carcinogen la șobolani. Obiectivul acestui studiu a fost de a elucida mecanismul său biochimic.

Metode:

Două grupuri de șobolani în vârstă de 21 de zile (câte 20) au fost hrăniți pentru o dietă de 44 săptămâni conținând ulei de ghee de vacă sau soia (10%). Cinci animale din fiecare grup au fost sacrificate la 0 zi și la 5, 21 și 44 săptămâni pentru analiza căilor de fază I și fază II enzime ale metabolismului cancerigenului.

Rezultate:

Ghee dietetic de vacă în raport cu uleiul de soia a scăzut activitățile enzimelor citocromului P450 (CYP), CYP1A1, CYP1A2, CYP1B1 și CYP2B1, responsabile de activarea cancerigenului în ficat. Activitățile de detoxifiere cancerigenă a uridinedifos-glucuronosil transferazei (UDPGT) și chinone reductazei (QR) în ficat și γ-glutamiltranspeptidazei (GGTP) și QR în țesutul mamar au fost semnificativ mai mari la șobolanii hrăniți cu ghee de vacă decât la șobolanii hrăniți cu ulei de soia. Activitatea hepatică GGTP a scăzut în dieta cu ulei de soia; în timp ce în grupul de vaci ghee a rămas neafectat.

Interpretare și concluzii:

Descoperirile noastre arată că ghee dietetic de vacă în comparație cu uleiul de soia reglează în jos activitățile enzimatice responsabile de activarea carcinogenului în ficat și reglează în sus activitățile de detoxifiere a cancerului în ficat și țesuturile mamare.

Majoritatea enzimelor care metabolizează cancerigeni sunt legate de membrană și necesită o membrană lipidică pentru activitatea lor. Prin urmare, metabolismul oxidativ al agenților cancerigeni din reticulul endoplasmatic al ficatului depinde în mod semnificativ de compoziția lipidei dietetice 6, 7. Cantitatea și calitatea grăsimilor alimentare afectează compoziția lipidică și caracteristicile fizice ale membranelor biologice și activitatea enzimatică a mai multor componente ale sistemului enzimatic care metabolizează medicamentul. Aceste modificări ale activităților enzimelor au fost asociate cu modificări ale mutagenității și carcinogenității pro-cancerigeni. Ținând cont de acest lucru și de raportul nostru anterior privind efectele diferențiale ale grăsimii din lapte și uleiului de soia asupra carcinogenezei induse chimic, studiul de față a fost conceput pentru a compara efectul acestor două grăsimi/uleiuri asupra diferitelor enzime metabolizatoare de fază I și faza II în ficatul de șobolan. și țesutul mamar.

Material și metode

Produse chimice: Benzoxirresorufină, etoxiresorufină, metoxirresorufină, pentoxirresorufină, sare de sodiu resorufină, dicumarol, acid uridinedifosfoglucuronic (UDPGA), γ-glutamil-p-nitroanilidă, glicilglicină și clorură de calciu MO au fost procurate de la St. Sigma-A. Toate celelalte substanțe chimice utilizate în acest studiu au fost de calitate analitică și au fost achiziționate de la furnizori locali.

Prepararea microsomilor hepatici: Ficatul excizat imediat după sacrificiu a fost spălat cu 0,9% NaCI și microsomii au fost preparați prin centrifugare diferențială 9. O parte din ficat a fost omogenizată în 3 volume în greutate de zaharoză 0,25 M răcită cu gheață în tampon fosfat de potasiu 0,01 M (pH 7,5) și centrifugată (12.000 × g la 4 ° C) timp de 20 min. Supernatantul a fost amestecat cu CaCI2 (8 mM) și centrifugat (27.000 × g la 4 ° C) timp de 15 minute. Peleta rezultată a fost spălată cu volum egal de 0,15 M KCl și recentrifugată (27.000 × g la 4 ° C) timp de 15 minute.

Pregătirea omogenatului tisular: Pentru activitatea glutation-S-transferazei (GST), omogenatul tisular (10%) preparat în tampon fosfat de potasiu 0,1 M (pH 7,0) a fost centrifugat (10 000 × g) timp de 30 de minute și supernatantul a fost filtrat prin hârtie de filtru Whatman pentru a îndepărta grăsimea. Pentru toate celelalte activități enzimatice, omogenatele tisulare (10%) au fost preparate în zaharoză 0,25 M în tampon de fosfat de potasiu (0,01 M, pH 7,4) și centrifugate (12.000 × g) timp de 20 de minute. Conținutul de proteine ​​microsomale și citosolice a fost determinat prin metoda Lowry și colab .

vacă

Greutatea corporală a șobolanilor hrăniți cu ulei de soia sau ghee de vacă. Valorile sunt medii ± SE (n = 5).