Shan Wu 1, 2, Shuo Feng 1, 2, ZhaoHong Ci 1, Chengyu Jiang 1, Yang Cui 1, Yuki Sasaki 1, Yukina Ota 1, Michiyuki Kojima 1,

efect

1 Departamentul Știința Producției de Alimente, Universitatea de Agricultură și Medicină Veterinară Obihiro, 11, Nishi-2-sen, Inada-machi, Obihiro, Hokkaido 080-8555, Japonia

2 Școala Absolventă Unită de Științe Agricole, Universitatea Iwate, 3-18-8, Ueda, Morioka, Iwate 020-8550, Japonia

  • Articol
  • Valori
  • Continut Asemanator
  • despre autori
  • Comentarii
  • Urmați autorii

Abstract

Aici am examinat efectele consumului de produse fermentate din hrișcă la șoareci hrăniți cu o dietă bogată în grăsimi. Hrișca a fost fermentată cu soia (1: 1) și orez timp de 6 luni (miso). Conținutul total fenolic și conținutul de 1,1-difenil-2-picrililhidrazil al produselor de fermentație din hrișcă (miso) au crescut odată cu fermentarea. În experimentele in vivo, șoarecii au fost hrăniți timp de 5 săptămâni cu o dietă bogată în grăsimi, cu sau fără suplimente, utilizând 10% miso din hrișcă. Suplimentarea alimentară cu miso din hrișcă a scăzut semnificativ nivelul seric de aspartat transaminazic și peroxidarea lipidelor în ficat, comparativ cu grupul martor. Mai mult, șoarecii care au primit miso de hrișcă au prezentat scăderi semnificative ale greutății corporale și ale greutății grăsimii retroperitoneale și mezenterice și au crescut conținutul de lipide fecale comparativ cu grupul martor. Aceste rezultate indică faptul că suplimentarea alimentară cu hrișcă, care se caracterizează printr-o activitate antioxidantă ridicată, are beneficii pentru sănătate, cum ar fi protecția ficatului și suprimarea greutății corporale crescute.

Cuvinte cheie: hrișcă, miso, dietă bogată în grăsimi, antioxidant, anti-obezitate, conținut fenolic total

Citați acest articol:

  • Shan Wu, Shuo Feng, ZhaoHong Ci, Chengyu Jiang, Yang Cui, Yuki Sasaki, Yukina Ota, Michiyuki Kojima. Efect anti-obezitate și activitate antioxidantă la produse cu conținut ridicat de grăsimi Șoareci alimentați cu produse din hrișcă fermentate (miso). Journal of Food and Nutrition Research. Vol. 4, nr. 6, 2016, pp. 355-360. http://pubs.sciepub.com/jfnr/4/6/3
  • Wu, Shan și colab. "Efectul anti-obezitate și activitatea antioxidantă la produsele cu grăsime alimentată cu șoareci alimentați cu hrișcă fermentată (miso)." Journal of Food and Nutrition Research 4.6 (2016): 355-360.
  • Wu, S., Feng, S., Ci, Z., Jiang, C., Cui, Y., Sasaki, Y., Ota, Y. și Kojima, M. (2016). Efect anti-obezitate și activitate antioxidantă la produse cu conținut ridicat de grăsimi Șoareci alimentați cu produse din hrișcă fermentate (miso). Journal of Food and Nutrition Research, 4(6), 355-360.
  • Wu, Shan, Shuo Feng, ZhaoHong Ci, Chengyu Jiang, Yang Cui, Yuki Sasaki, Yukina Ota și Michiyuki Kojima. "Efectul anti-obezitate și activitatea antioxidantă la produsele cu grăsime alimentată cu șoareci alimentați cu hrișcă fermentată (miso)." Journal of Food and Nutrition Research 4, nr. 6 (2016): 355-360.
Importați în BibTeXImportați în EndNoteImportați în RefManImportați în RefWorks

Dintr-o privire: Cifre

figura 1

figura 1

Figura 2

Figura 3

1. Introducere

Hrișca este un aliment bogat în proteine, care este utilizat pe scară largă în tăiței și dulciuri în Japonia. În plus, este considerat un aliment sănătos, bogat în antioxidanți. În special, rutina găsită în hrișcă are efecte farmacologice, cum ar fi prevenirea fragilității vasculare și întărirea peretelui vascular [Nutrienți, 2 (8). 889-902. 2010. "> 1, BioFactori, 26 (4). 273-281. 2006. "> 2, Obezitate, 16 (9). 2081-2087. 2008. "> 3]. Aportul de hrișcă poate fi asociat cu scăderea nivelului de colesterol al lipoproteinelor cu densitate mică (LDL) [4]. Ingerarea rutinei și a quercetinei afectează metabolismul lipidelor la animale [BioFactori, 26 (4). 273-281. 2006. "> 2, The Journal of Nutrition, 141 (6). 1062-1069. 2011. "> 5, Jurnalul Agriculturii și Chimiei Alimentelor, 57 (2). 425-431. 2009. "> 6, Anais da Academia Brasileira de Ciências, 81 (1). 67-72. 2009. "> 7]. Cele două specii majore de hrișcă cu semnificație agricolă sunt hrisca obișnuită (Fagopyrum esculentum Hrișcă dulce și hrișcă tartară (F. tataricum (L.) Gaertn.) Sau hrișcă amară [8]. Hrișca obișnuită este cultivată pe scară largă în Asia, Europa și America, în timp ce hrișca tartară este cultivată mai ales în Asia (de exemplu, China, Bhutan, Nepal și India) cu o cantitate mică de producție în regiunea Islek din Europa a Luxemburgului, Germaniei și Belgia) [9]. În Japonia, specia comună este în general utilizată pentru procesarea tăiței de hrișcă. Cu toate acestea, utilizarea tipică a hrișcului se limitează în principal la tăiței; prin urmare, sunt dorite metode avansate de prelucrare și produse noi din hrișcă.

Fermentarea este un proces condus de microorganisme care produce produse de valoare ridicată din substraturi brute sau de calitate inferioară [10]. În special, fermentarea pe bază de microorganisme este utilizată pentru a produce produse alimentare și pentru a produce în mod industrial compuși organici, adică amidonul poate fi descompus în fragmente mai mici odată cu eliberarea de dioxid de carbon; în timpul procesului de preparare a zahărului, zaharurile pot fi descompuse în alcool cu ​​eliberarea de dioxid de carbon; iar în producția de pastă de fasole (miso), proteinele pot fi descompuse în molecule mici de peptide și aminoacizi, amidonul poate fi descompus în glucoză, iar grăsimile pot fi descompuse în acizi grași și glicerol. Se consideră că fermentația îmbunătățește valoarea nutrițională a alimentelor și o descompune în forme catabolizabile mai ușor [Food Research International, 81. 1-16. 2016. "> 10, Journal of Applied Microbiology, 100 (6). 1171-1185. 2006. "> 11] .

Aici am fermentat un amestec de hrișcă și soia (miso) și am determinat caracteristicile fizice și chimice ale miso-ului obținut. Mai mult, am investigat efectele miso-ului în ceea ce privește activitatea sa antioxidantă și efectul antiobezității la șoarecii hrăniți cu o dietă bogată în grăsimi (HFD).

2. Materiale și metode

Produsele de fermentație (miso), hrișcă și soia (data producției, 2011, data expirării, 2013.11), au fost obținute de la Hosokawa Seian Co. Ltd (Tokachi, Japonia) și orezul - care sare a fost achiziționată de la Salt Industry Center (Japonia). Miso-ul din hrișcă și soia (BWM) a fost preparat după cum urmează (Tabelul 1).

Tabelul 1. Proporțiile de soia, orez-koji, hrișcă, sare, apă de semințe și miso de semințe utilizate în producția de miso

În primul rând, 1,25 kg boabe de soia crude și 1,25 kg grâu hrișcă au fost înmuiate în apă (fasole: apă distilată = 1: 3, g/g). Mai mult, boabele de soia înmuiate și hrișca au fost plasate în cinci pahare de 1 L cu apă de înmuiere și autoclavate (KT-3045, ALP Co. Ltd, Japonia) la 110 ° C timp de 20 de minute. Pasta a fost preparată prin zdrobirea boabelor de soia aburite și hrișcă, care au fost amestecate (KN1500, Taisho Electric MFG. Co. Ltd, Japonia) cu orez-koji, sare, apă de semințe și miso de semințe, așa cum se arată în tabelul 1. BWM a fost ambalate (10 kg) în butoaie de murături (Shinkigosei Co. Ltd, Japonia) și fermentate la 25 ° C –30 ° C timp de 180 de zile. Conținutul fiecărui recipient a fost amestecat bine o dată pe lună timp de 30 de minute folosind un mixer (KN1500). Produsele au fost prelevate pentru analiză înainte de fermentare (0 luni) și după fermentare timp de 3 și 6 luni. O porțiune din proba obținută după fermentare timp de 6 luni a fost liofilizată și utilizată ca supliment alimentar în experimentele pe animale.

2.2. Proprietăți fizico-chimice

Probele (5 g) au fost extrase cu 10 ml de apă distilată și centrifugate de trei ori. Solidele solubile au fost măsurate în extracte de apă folosind un refractometru digital de buzunar (PAL-Patissier; Atago Co. Ltd) și conținutul de acid L-glutamic a fost determinat folosind un kit de testare a acidului L-glutamic II (Yamasa Corporation Co. Ltd, Japonia). Culoarea suprafeței miso-ului fermentat timp de 6 luni a fost măsurată folosind un Chroma Meter (MINOLTA CR-200, Japonia), iar intensitatea culorii a fost cuantificată cu ed cu scale L * a * b * în spațiul de culoare CIE LAB [13] . Au fost măsurate valorile L *, a * și b *. Datele au fost exprimate ca medie pe baza a 20 de măsurători.

2.3. Conținutul fenolic total și activitatea antioxidantă

Fiecare probă miso a fost extrasă de trei ori cu 80% etanol și 70% acetonă, unde volumul final al extractului a fost de 60 ml. Fiecare extract de miso a fost utilizat pentru a determina conținutul fenolic total (TPC) și activitatea antioxidantă.

TPC a fost determinat folosind metoda Folin-Ciocalteau [Journal of Food and Nutrition Research, 3. 131-137. 2015. "> 12, Chimia alimentelor, 104. 830-834. 2007. "> 14] cu ușoare modificări. Extractele de Miso (100 μL) au fost amestecate cu 300 μL de apă distilată, 400 μL de reactiv Folin - Ciocalteu (diluat anterior de două ori cu apă distilată) și 400 μL de Na 2 CO 3 (100 g/L) și a fost plasat la 30 ° C timp de 30 min. Absorbanța a fost măsurată la 760 nm și exprimată ca mg de acid galic (1 g/L). Gama de liniaritate a curbei de calibrare a fost de 0-125 μg ( r = 0,998).

Testul 1,1-difenil-2-picrililhidrazil (DPPH) a fost realizat în conformitate cu metoda îmbunătățită raportată de Blois [Journal of Food and Nutrition Research, 3. 131-137. 2015. "> 12, Chimia alimentelor 194. 705-711. 2016. "> 15]. Extractele de miso (150 μL) au fost incubate cu același volum de 2 mM de DPPH în etanol în întuneric timp de 15 minute, iar scăderea absorbanței la 517 nm a fost măsurată utilizând un cititor de microplăci cu 96 de godeuri (MTP300, Corona electric Co. Ltd, Japonia) Curbele standard au fost construite folosind standardele Trolox (0-30 nM) și activitatea antioxidantă a extractelor a fost exprimată în echivalenți Trolox (nM).

2.4. Animale și diete

Șoareci masculi ddY (în vârstă de 7 săptămâni; Japan SLC, Inc., Shizuoka, Japonia) au fost adăpostiți în cuști de plastic într-o cameră pentru animale, care a fost menținută cu un ciclu de lumină 12:12 h: întuneric, perioadă de lumină, 8: 00-20: 00) la o temperatură constantă de 23 ° C ± 2 ° C și umiditate relativă de 60% ± 5%. Șoarecii au fost repartizați aleatoriu în patru grupuri (n = 5) și au fost hrăniți cu HFD timp de 2 săptămâni. Grupul de control a fost alimentat cu HFD suplimentat cu o dietă normală de 10% (grupul HFD), în timp ce celelalte grupuri au fost hrănite cu HFD suplimentat cu 10% BWM (grupul BWM-HFD).

Șoarecilor li s-a permis accesul gratuit la alimente și apă, iar ratele de aport au fost înregistrate. După 5 săptămâni, s-au măsurat greutatea corporală finală și greutățile fecale. În ultima zi a experimentului, șoarecii au fost postiti peste noapte, au fost anesteziați folosind injecție nembutală (0,75 μL/g greutate corporală) și s-a efectuat laparotomie. Sângele a fost colectat din inimă și rapid amestecat cu EDTA-2Na ca anticoagulant, înainte de separare prin centrifugare la 1000 ×g timp de 30 min. Ficatele și rinichii au fost colectate, cântărite, congelate rapid în azot lichid și depozitate la -20 ° C până la analiza lor.

Animalele experimentale au fost manipulate în conformitate cu Ghidul pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de laborator [16] și regulamentele Corporației Naționale Universitare Obihiro Universitatea de Agricultură și Medicină Veterinară pentru experimentele pe animale. Proiectul experimental a fost aprobat de Comitetul de Experimentare a Animalelor din cadrul Universității de Agricultură și Medicină Veterinară Obihiro și a aderat la principiile standard descrise în Ghidul pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de laborator [17]. .

2.5. Analiza serelor, organelor și fecalelor

Nivelurile de lipide neutre, acizi grași liberi, fosfolipide, colesterol total, colesterol LDL, alanină aminotransaminază (ALT), aspartat transaminază (AST) și lactat dehidrogenază (LDH) din ser au fost măsurate cu ajutorul unui analizor TDX (Abbott Japan Co. Ltd, Tokyo, Japonia).

Peroxidarea lipidelor în ser a fost evaluată prin determinarea substanțelor reactive ale acidului tiobarbituric (TBARS), în care s-au adăugat 400 μL soluție de dodecil sodic 8,1% la 100 mg ficat, înainte de a adăuga 300 μL tampon de acid acetic 20% (pH 3,5) și 500 μL de apă distilată. Amestecul a fost omogenizat utilizând un omogenizator de teflon și 600 μL au fost transferați într-un tub curat de sticlă uscată conținând un volum egal de 25 ppm soluții apoase de sulfat de cupru (II) și amestecul de reacție a fost incubat timp de 1 oră la 37 ° C. După reacție, 950 μL s-au plasat într-o eprubetă cu capac, înainte de a adăuga 25 μL de acid acetic butilat hidroxitoluen 0,8% și 750 μL alcool butil terțiar 0,8%. După plasarea amestecului de reacție timp de 1 oră pe gheață, acesta a fost incubat la 100 ° C timp de 1 oră într-un bloc de încălzire și răcit în apă curentă, după care 500 μL de apă distilată și 2,5 ml de n-butanol: piridină (15: 1) s-au adăugat cu agitare puternică. Amestecul a fost supus centrifugării la 1.500 xg timp de 10 min, iar absorbanța supernatantului a fost măsurată la 532 nm. Peroxidarea lipidelor a fost calculată ca cantitate de 1,1,3,3-tetraetoxipropan [Acvacultură, 454. 176-183. 2016. "> 18, Nippon Shokuhin Kagaku Kogaku Kaishi, 53. 386–392. 2006. "> 19] .

Masele fecale liofilizate au fost degresate, redizolvate în izopropanol și analizate pentru a determina conținutul de colesterol folosind un kit de testare Wako colesterol-E (Wako Pure Chemical Industries Ltd, Osaka, Japonia).

Conținutul de acid biliar a fost măsurat prin extragerea a 100 mg de fecale cu trei volume de apă distilată timp de 20 de minute prin sonicare. Extractul a fost centrifugat la 1.000 xg, iar supernatantul a fost colectat. Procedura a fost efectuată de trei ori și supernatantele au fost combinate. Conținutul de acid biliar a fost măsurat folosind un kit de testare a acidului biliar total Wako (Wako) și exprimat ca cantitate de acid colic [19] .

2.6. Analize statistice

Datele au fost exprimate ca medie ± eroare standard. Diferențe semnificative au fost determinate de testul ANOVA și al gamei studiate de Tukey (Diferența semnificativă sincer) (SAS 9.3, SAS Institute Inc.). Diferențele au fost considerate semnificative la p 3. Rezultate si discutii

Fermentarea de hrișcă (miso) include hidroliza proteinelor în aminoacizi și amidon în glucoză [20]. Am determinat conținutul de acid L-glutamic și solide solubile din miso, care a crescut odată cu fermentarea (Tabelul 2).