Abstract

Au fost stabilite modele de șoareci modificate genetic de cancer pancreatic care recapitulează tumorigeneză pancreatică umană. Cu toate acestea, costul asociat cu generarea și adăpostirea acestor șoareci poate fi prohibitiv. Latența tumorală și progresia către boli invazive în aceste modele sunt, de asemenea, foarte variabile. Modelele de xenograft de șoarece de cancer pancreatic uman, inclusiv heterotopic și ortotopic, au fost utilizate pe scară largă în studiile preclinice pentru costul lor relativ scăzut și creșterea rapidă, previzibilă a tumorii. Dintre cele două, modelele ortotopice de șoarece tumoral sunt preferate deoarece oferă patologie specifică situsului tisular, permit studii de metastază și sunt, în general, considerate mai relevante din punct de vedere clinic. Aici descriem procedurile de implantare a liniilor de celule canceroase pentru a genera modele de șoarece ortotopic pentru cancerul pancreatic.

tumoră

1. Introducere

Cancerul pancreatic este a patra cauză principală de deces prin cancer în țările dezvoltate, inclusiv în Statele Unite. Boala are cel mai prost prognostic în afecțiunile maligne gastro-intestinale, cu o rată globală de supraviețuire la 5 ani mai mică de 5%. Din păcate, această rată de supraviețuire slabă nu s-a îmbunătățit în ultimele decenii, deși s-au realizat progrese dramatice în înțelegerea geneticii moleculare a carcinogenezei pancreatice umane (1). Prin urmare, căutarea biomarkerilor de detectare precoce și a genelor țintă noi și dezvoltarea de noi strategii terapeutice pentru această boală sunt încă în cerere urgentă. Modelele de șoarece de cancer pancreatic, inclusiv modelele de șoareci modificate genetic și modelele de șoareci cu xenogrefă tumorală s-au dovedit a fi foarte utile în avansarea acestor fronturi ale cercetării cancerului (2-5).

Modelele imunodeficiente de șoareci de implantare ortotopică nu reproduc complet procesul tumorigenezei naturale la om din cauza lipsei unui microambient tumoral comparabil. Se acceptă în mod obișnuit că celulele imune ale gazdei din microambientul tumoral joacă roluri critice în progresia și metastaza tumorii pancreatice. Cu toate acestea, xenogrefarea celulelor canceroase umane direct într-o gazdă murină imunocompetentă ar avea ca rezultat doar respingerea grefei. Recent, mai multe modele de șoareci modificate genetic au fost validate pentru a recapitula întregul spectru al tumorigenezei pancreatice la om (2, 3, 8). Tumorile pancreatice invazive din aceste modele de șoarece pot fi o sursă bună pentru generarea de modele de șoarece pancreatic ortotopic simgenetic într-o gazdă imunocompetentă de șoarece (9). Modelele de șoarece pancreatic ortotopic simgenic cuprind atât avantajele modelelor de șoarece ortotopic, cât și ale modelelor de șoareci modificate genetic și reprezintă o alternativă cu costuri mai mici la modelele de șoareci modificate genetic. Aici ne concentrăm asupra procedurilor pentru generarea chirurgicală de modele de șoareci de cancer pancreatic ortotopic utilizând linii de celule canceroase.

2. Materiale

2.1. Reactivi

RPMI-1640 sau mediu DMEM pentru cultura de celule tumorale.