KA Holoyda 1, KA Schall 1, C. Lien 2, TC Grikscheit 1 1 Spitalul pentru copii din Los Angeles/Institutul de cercetare Saban, Departamentul de chirurgie pediatrică, Los Angeles, CA, SUA 2 Spitalul pentru copii din Los Angeles/Institutul de cercetare Saban, Divizia Of Chirurgie Cardiotoracică, Los Angeles, CA, SUA

modifică

Introducere: Semnalizarea factorului de creștere a fibroblastelor (Fgf) este esențială pentru dezvoltarea multor organe, inclusiv a intestinului, prin rolul său în proliferarea celulară și diferențierea epiteliului. Expresia receptorului Fgf (Fgfr) a fost indusă în timpul adaptării intestinale după rezecția masivă a intestinului. Componentele acestei căi sunt conservate între oameni și pești zebră. Rolul semnalizării Fgf în modelul sindromului de intestin scurt al adulților zebră (SBS) nu este încă definit. Am emis ipoteza că inhibarea semnalizării Fgf ar afecta adaptarea intestinală în modelul SBS de pește zebră.

Metode: Cu aprobarea IACUC, SBS a fost generat la masculul adult hsp70: dnfgfr1-GFP pește zebră. Acestea au fost comparate cu operația simulată de pește zebră care a suferit laparotomie singură. Heatshock a fost efectuat zilnic pe sham și pește zebră SBS timp de 2 săptămâni (HS SBS n = 5, HS sham n = 4) pentru a reduce expresia fgfr. Aceste grupuri au fost comparate cu peștele zebraf transgenic tratat fără șoc termic (NHS SBS n = 5, NHS sham n = 4). Greutățile peștilor zebră au fost obținute în momentul intervenției chirurgicale și săptămânal înainte de sacrificiu. Intestinul proximal a fost recoltat la 2 săptămâni. S-a efectuat colorarea H&E și albastru alcian. Imunofluorescența a fost efectuată pentru BrdU și TUNEL. RT-qPCR a fost efectuat pentru fgfr1. Perimetrul epitelial Villus (VEP) a fost măsurat și procentele de celule BrdU (+), albastru alcian (+) și TUNEL (+) per hemivilus au fost calculate de un observator orbit, antrenat cu ImageJ. Testul T al elevului a fost utilizat pentru a determina semnificația.