Pregătirea Solidago caucasica extractul din plante uscate din plantă a fost studiat de noi pentru prima dată. Principalul indicator de calitate a fost un conținut de flavonoizi de ≥ 2,5%. Au fost prezenți și alți compuși biologic activi, de exemplu, cumarine, acizi carboxilici fenolici și acizi organici.

Solidago caucasica Chem.-Nath. (Asteraceae) este indigenă în Caucaz. Preparate pe bază de materii prime de mai multe Solidago spp. (S. virgaurea, S. canadensis, S. gigantea) sunt utilizate în practica farmaceutică internă și globală pentru prevenirea și tratarea inflamațiilor tractului urinar, prostatitei, urolitiazei și a altor boli [1]. Farmacognozia reprezentanților slab studiați ai acestui gen ca surse de materii prime pentru plante medicinale noi (MPR) și compuși activi din punct de vedere farmacologic rămâne o direcție promițătoare în ceea ce privește extinderea varietății MPR interne pentru uz medical și rezolvarea problemelor de substituție a importurilor și a noilor eficacități dezvoltarea medicamentelor.

Flavonoide, cumarine, acizi carboxilici fenolici [2], acizi organici [3], aminoacizi [4], triterpene [5], carbohidrați [6] și macro și microelemente [4] au fost detectate și identificate de noi pentru prima timpul în S. caucasica iarbă.

Solidago caucasica extractul din plante uscate a fost preparat folosind macerarea, care a fost cea mai simplă și mai compactă metodă și este utilizată pe scară largă în industrie. Investigațiile preliminare au constatat că EtOH (50%) a dat cel mai mare randament de compuși extrasați. Prin urmare, a fost ales ca extractant [7].

Partea experimentală

Solidago caucasica iarba a fost colectată în defileul râului Daut până la pasul Uchkulan (districtul Karachay, Republica Karachay-Cherkessia) la începutul înfloririi prin tăierea părții superioare a tulpinilor (25 - 30 cm).

Materia primă a fost măcinată la dimensiunea particulelor ≤ 7 mm, încărcată într-un rezervor de macerare și tratată cu EtOH (50%, raport 1:10). Extracția a folosit macerarea fracționată (în patru etape). Extractul total a fost filtrat într-un balon evaporator-vid prin trei straturi de pânză de brânză. Extractul rezultat a fost condensat prin evaporare la 50 - 60 ° C și presiune redusă (600 - 500 mm) la o grosime adecvată. Extractul gros a fost plasat într-un dulap de uscare sub vid și uscat până la umiditatea reziduală ≤ 5% (la 60 - 65 ° C) [7]. Extractul uscat a fost măcinat într-o moară cu bile, ambalat ermetic în pungi de polietilenă și depozitat într-un loc întunecat la 15 - 25 ° C conform SP XIIIth Ed. [8]. Randamentul produsului final recalculat ca materie primă uscată la aer a fost de 24,94 ± 0,52%.

Rezultate si discutii

Obținute Solidago caucasica extractul din plante uscate a permis studierea indicatorilor conform cărora ar trebui standardizat.

Descriere. Pulbere maro închis, aromă aromatică specifică.

Solubilitate. Ușor solubil în H2O și EtOH (50%), practic insolubil în CHCl3 [8].

Identitate. Extract uscat (

0,01 g) a fost plasat într-un tub, tratat cu EtOH (95%, 5 ml), agitat timp de 3 minute, tratat cu HCI (concentrație, 10 picături) și Mg metalic (0,015 g) și încălzit pe apă clocotită baie timp de 3 min. După 5 min, s-a observat o culoare roz (flavonoide).

Spectrul de absorbție al extractului uscat în EtOH (70%) a arătat un maxim la 410 ± 2 nm în intervalul 350 - 450 nm. Pentru aceasta, extractul uscat (

0,5 g, greutate exactă) a fost plasat într-un balon volumetric de 50 ml, dizolvat în EtOH (70%, 30 ml) și ajustat la marcaj utilizând același solvent (soluția A). Soluția A (1 mL), HOAc (33%, 0,5 mL) și soluția de AlCl3 (2%, 1 mL) au fost plasate într-un balon volumetric de 25 mL și ajustate la semn cu EtOH (95%) (soluția B) . Densitatea optică a soluției a fost măsurată după 40 min într-o cuvă de 10 mm pe un spectrofotometru la 410 nm, care a corespuns cu absorbția maximă a rutinei (Fig. 1).

cercetare

Spectrul de absorbție al flavonoizilor din Solidago caucasica cu AlCl3.

Pierderea de masă la uscare. Extractul obținut (

0,5 g, greutate exactă) s-a uscat într-un dulap de uscare la 102,5 ± 2,5 ° C timp de 5 ore, s-a răcit într-un desicator timp de 30 min și s-a cântărit. Masa se dezlantuie la uscare Solidago caucasica extractul din plante uscate a fost de 4,17 ± 0,13% (n = 6), care a fost mai mică decât norma de 5% [8].

Metale grele. Conținutul de metale grele din extract a fost ≤ 0,01% [8].

Puritate microbiologică. Extrasul a îndeplinit cerințele date în SP XIIIth Ed. (categoria 3.B) [8]. Rezultatele au îndeplinit cerințele SP XIII Ed. pentru puritatea microbiologică a substanțelor naturale (tabelul 1).

Determinarea cantitativă. Solidago caucasica extractul de plante a fost standardizat pentru conținutul de rutină, deoarece flavonoidele au fost grupul dominant de compuși biologic activi în procente. Flavonoidul dominant a fost rutina conform HPLC. Conținutul cantitativ de flavonoide recalculat ca rutină în extractul de S. caucasica și determinat la 410 ± 2 nm folosind spectrofotometrie diferențială cu soluție de AlCl3 adăugată (2%) a fost de 3,03 ± 0,2% (n = 6) (Tabelul 2) [9].

Metoda de determinare cantitativă a fost validată pentru a confirma că ar putea fi utilizată pentru flavonoizi. S-a găsit o regiune în care densitatea optică era liniar dependentă de concentrația de flavonoizi. Coeficientul de corelație calculat a fost 0,996. Acest lucru a fost suficient de aproape de unitate pentru a lua în considerare densitatea optică liniar dependentă de conținutul de flavonoid din extract.

Precizia metodei în ceea ce privește repetabilitatea a fost stabilită utilizând nouă măsurători paralele. Abaterea standard relativă (RSD) a fost de 2,85%, ceea ce a indicat că rezultatele converg satisfăcător.

Acuratețea metodei a fost determinată utilizând conținutul cantitativ de flavonoide recalculate ca rutină în soluții produse prin adăugarea standardului de referință rutină la extract. Recuperarea medie a fost de 99,78%; RSD, 2,61%, care a corespuns RSD optim pentru această metodă.

Compuși fenolici în S. caucasica extractul în plus față de indicatorii săi de calitate au fost studiați utilizând HPLC pe un cromatograf lichid Gilson (Franța). Faza staționară a folosit o coloană metalică (4,6 × 250 mm) ambalată cu Kromasil C18 (5 μm). Faza mobilă a fost MeOH-H2O-H3PO4 (conc.) (400: 600: 5) la un debit de 0,8 ml/min. A fost utilizat un detector Gilson Model 151 UV/Vis la 254 și 360 nm. Standarde de referință pentru rutină, vicenină, hesperidină și acid galic (Sigmabiosinteză); pentru analize s-au folosit umbelliferona și esculetina (Aldrich), acidul chicoric (Sigma) și acizii clorogenici și cafeici (Sigma-Aldrich).

Extractul uscat obținut folosind EtOH (70%) a dat flavonoide (rutină, hesperidină, vicenină), cumarine (esculetină, umbelliferonă) și acizi carboxilici fenolici (chicoric, galic, cofeic, clorogenic) care au fost identificați prin comparație cu standardele de referință [10 ].

Acizii organici au fost studiați utilizând HPLC. Condițiile cromatografice au inclus o HPLC Gilson (Franța), o coloană metalică Alltech OA-1000 Acizi Organici (6,5 × 300 mm), 60 ° C, fază mobilă a soluției de H2SO4 (0,005 M) la debit 3 mL/min și detector UV la 190 nm.

Extractul apos din Solidago caucasica extractul din plante uscate conținea acizi malic, citric și succinic în comparație cu standardele de referință (Dr. Ehrenstorfer) [11].

Acizii carboxilici fenolici din extractul EtOH (50%) recalculat ca acid cafeic au fost, de asemenea, determinați cantitativ utilizând spectrofotometrie directă la 329 ± 2 nm. Conținutul de acizi carboxilici fenolici din extractul uscat recalculat ca acid cafeic s-a dovedit a fi de 1,72 ± 0,04% (n = 6, ε = 2,45%) [12].

Perioada de valabilitate a Solidago caucasica extractul din plante uscate a fost determinat prin analiza îmbătrânirii naturale a probelor de extract la fiecare șase luni (Tabelul 3). Extractul uscat a fost ambalat ermetic în pungi de polietilenă și depozitat în întuneric la 15 - 25 ° C. Probele au fost prelevate conform SP XIII Ed. [8].

Rezultatele au indicat faptul că durata de valabilitate recomandată a extractului a fost ≤ 2 ani. Principalul indicator de calitate a fost conținutul de flavonoizi de ≥ 2,5%.

Studiile privind activitatea diuretică au constatat că doza optimă de extract a fost de 300 mg/kg, deoarece ar trebui să crească în mod constant diureza la șobolani cu 64%, comparativ cu animalele netratate [13].

Activitatea antibacteriană a fost studiată conform SP XIII Ed. [8]. Activitatea antibacteriană a extractului uscat a fost studiată folosind soluțiile sale apoase de concentrații 20, 10, 5, 2,5 și 1%, metoda sondei și 11 culturi de testare. Analizele au constatat activitate antibacteriană împotriva bacteriilor Gram-pozitive (bacili și stafilococi) și Gram-negative (P. aeruginosa și Proteus). Activitatea antibacteriană a unei soluții de 20% a fost considerabil mai mare împotriva enterobacteriilor (E coli și Proteus), stafilococi și P. aeruginosa. Activitatea antibacteriană a unei soluții de 10% împotriva stafilococilor și a bacteriilor Gram-negative nu a diferit semnificativ de cea a soluției de 20% și a fost ușor mai slabă împotriva bacililor. Activitatea antibacteriană a soluțiilor mai diluate a scăzut în consecință [10].

Flavonoide (rutină, hesperidină, vicenină), cumarine (esculetină, umbeliferonă), acizi carboxilici fenolici (chicoric, galic, cafeic, clorogenic) și acizi organici (malic, citric, succinic) au fost detectați pentru prima dată în Solidago caucasica extract uscat din plante. Conținutul cantitativ de flavonoizi a fost de 3,03 ± 0,02%; acizi carboxilici fenolici, 1,72 ± 0,04%.

Prin urmare, Solidago caucasica extractul din plante uscate a fost produs prin macerare fracționată. Au fost dezvoltate metode de standardizare care erau necesare pentru o evaluare consecventă și obiectivă a identității și calității. Principalul indicator al calității a fost un conținut de flavonoizi de ≥ 2,5%. A fost validată metoda de determinare a flavonoizilor.

Referințe

V. V. Fedotova și V. A. Chelombit’ko, Nauchn. Noi stim. BelGU Ser. Med. Fermă., Nu. 16 (135) (19), 136 - 145 (2012).

V. V. Fedotova și V. A. Chelombit’ko, Nauchn. Noi stim. BelGU Ser. Med. Fermă., Nu. 10 (129) (18), 175 - 177 (2012).

V. V. Fedotova, A. V. Okhremchuk și V. A. Chelombit’ko, Nauchn. Noi stim. BelGU Ser. Med. Fermă., Nu. 16 (135) (19), 173 - 175 (2012).

V. V. Fedotova și V. A. Chelombit’ko, în: Lucrările celei de-a II-a Conferințe internaționale științifico-practice „Abordări cluster ale Uniunii farmaceutice: educație, știință și afaceri” [în rusă], Belgorod (2012), pp. 184 - 187.

V. V. Fedotova, E. T. Oganesyan și V. A. Chelombit’ko, Fermă. Farmacol., Nu. 4 (5), 52 - 56 (2014).

V. V. Fedotova, V. A. Chelombit’ko și M. Kh. Malikova, Khim. Prir. Soedin., Nu. 4, 621 - 622 (2013).

V. V. Fedotova și V. A. Chelombit’ko, în: Colecție de lucrări științifice „Dezvoltarea, cercetarea și comercializarea noilor produse farmaceutice” [în rusă], Volgograd (2013), pp. 113 - 114.

Farmacopeea de Stat a Federației Ruse, Ediția a XIII-a, Moscova (2015).

V. V. Fedotova și D. A. Konovalov, în: Lucrările din 4 a Conferință științifico-practică interregională cu participare internațională „Probleme în știința și practica farmaceutică” [în rusă], Vladikavkaz (2014), pp. 22 - 25.

VV Fedotova, VA Chelombit’ko și NV Postnikova, Med. Al? Manakh, Nu. 25 (1), 185 - 188 (2013).

V. V. Fedotova și V. A. Chelombit’ko, în: Rezumate de lucrări ale jubileului XX-lea Congres național rus „Omul și medicina” [în rusă], Moscova (2013), p. 451.

VV Fedotova, Abstract's Author of a Candidate Dissertation, Pyatigorsk (2014).

VV Fedotova, A. Yu. Terekhov, A. A. Kobin, și colab., În: Colecție de lucrări științifice din lucrările Conferinței internaționale științifico-practice „Tendințe actuale în educație și știință” [în rusă], Tambov (2013), pp. 132 - 133.

Informatia autorului

Afilieri

Institutul Medico-Farmaceutic Pyatigorsk, Filiala Universității Medicale de Stat din Volgograd, Ministerul Sănătății din RF, 11 prosp. Kalinina, Pyatigorsk, Stavropol Krai, 357532, Rusia

VV Fedotova și DA Konovalov

Puteți căuta acest autor și în PubMed Google Scholar

Puteți căuta acest autor și în PubMed Google Scholar

autorul corespunzator

Informatii suplimentare

Traducere din Khimiko-Farmatsevticheskii Zhurnal, Vol. 52, nr. 3, pp. 28 - 31, martie, 2018.